JM109感受態細胞

保存條件：-80℃。

1.產品簡介：

本產品是采用大腸桿菌JM109菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞，提取高質量DNA的理想菌株，可用于構建克隆，藍白斑篩選實驗。

基因型：recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17(rk - mk+ ), e14- (mcrA- ), supE44, relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]

特點：1．JM109是一種琥珀抑制型F’重組缺陷菌株，帶有lacZΔM15，后者使得與在λZAP中編碼的β-半乳糖苷酶氨基端進行α-互補，可用于藍白斑篩選。2． recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩定和高純度質粒DNA的提取。3．支持M13噬菌體載體的生長，對轉染的DNA有修飾作用，但無限制作用使用。pUC19質粒檢測，轉化效率可達108 cfu/μg DNA，適用于高效的質粒DNA克隆并能保證高拷貝質粒的穩定復制。

2.使用說明：

1．取100 μl感受態細胞置于冰浴中融化。

2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30min。

3．42℃熱擊45sec，然后快速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3min，該過程不要搖動離心管。

4．每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床， 150 rpm振蕩培養45～60min使菌體復蘇。

5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12~16h。

3.注意事項：

1．剛化凍的細胞轉化效率最高，避免反復化凍。

2．整個動作要輕柔。

*本試劑僅供實驗室研究使用