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光遺傳(抑制 Cre依賴)rAAV-CAG-DIO-Arch-EYFP

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rAAV: Recombinant adeno-associated virus, 重組腺相關(guān)病毒。以重組腺相關(guān)病毒為載體,安全性高(目前還沒有發(fā)現(xiàn)rAAV對人體致病),免疫原性低(感染后很少被免疫系統(tǒng)所清除),表達時間長。

CAG:是人工構(gòu)建的組合型強啟動子,由巨細胞病毒(the cytomegalovirus,CMV)早期增強子(early enhancer element)和雞β-肌動蛋白( chickenbeta-actin )啟動子和兔的beta-globin剪接受體組成。用于驅(qū)動基因在哺乳動物中的高水平表達。
DIO:Double-floxed inverse Orientation, 是和Cre重組酶配合控制目的基因表達的元件。如果沒有Cre重組酶的話目的基因不表達,在有Cre 的情況下目的基因才能開始表達。

Arch:光驅(qū)動的外向氫離子泵,屬于Archaerhodopsin。在神經(jīng)元中可以輕易達到900pA 的抑制電流,從而抑制幾乎所有的電生理活動。雖然H+離子不是內(nèi)在神經(jīng)電生理活動所使用的離子類型,但H+離子外流可以被細胞自身機制補償,不會導(dǎo)致細胞內(nèi)外pH 不平衡的狀況。Arch 一般用570nm 左右的黃綠光激活。
EYFP:黃色熒光蛋白,激發(fā)波長513nm,發(fā)射波長527nm。