CFDA/SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒
產品名稱: CFDA/SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒
英文名稱: CFDA SE Cell Proliferation and Tracking Kit
產品編號: C331306
產品價格: 398
產品產地: 美國
品牌商標: Arcegen
更新時間: 2025-10-20T09:25:48
使用范圍: null
| 規格 | 價格 |
| 500T | 398.0 |
| 1000T | 728.0 |
- 聯系人 : 孟醒
- 地址 : 申江南路4388號1幢2層208室
- 郵編 : 201314
- 所在區域 : 上海
- 電話 : 189****7703 點擊查看
- 傳真 : 點擊查看
- 郵箱 : cmeng@magibagbio.com
產品簡介
CFDA-SE Cell Proliferation and Tracking Kit 是基于 CFDA-SE 對細胞進行示蹤及增殖檢測的試劑盒 ,由 CFDA-SE 粉末、溶劑及細胞染色緩沖液組成。
CFDA-SE 具有細胞膜滲透性 ,本身不發出熒光。當其通過被動運輸穿透細胞膜進入活細胞后 ,可被胞漿內 的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester, CFSE) ,后者可發出 強烈的綠色熒光 ,且不能穿過細胞膜 ,可保留在胞內。CFDA-SE 標記細胞的熒光非常均一 ,可隨著細胞的 分裂增殖而被子代細胞均勻繼承 ,其含量的衰減與細胞分裂次數成正比 ,該熒光信號可在 488 nm 的激發 光下進行檢測。CFSE 還可自發性不可逆地與細胞內的氨基結合從而偶聯到細胞蛋白質上,同時過量且未被 偶聯的 CFDA-SE 通過被動擴散回到細胞外培養基中 ,經過后續清洗步驟被清除。
CFDA-SE 不僅可用于細胞增殖的體外實驗 ,還可用于追蹤細胞在體內的分裂增殖過程。經 CFDA-SE 標記 的非分裂細胞的熒光非常穩定 ,穩定標記的時間可達數月 ,因此非常適用于細胞群落分析。
本品包含配制 CFDA-SE 儲存液所需的粉末、溶劑和細胞標記用的染色緩沖液 ,簡化了實驗前期準備工作。 另 ,CFDA-SE 標記細胞一般 15 min 即可完成 ,對于不同細胞 ,需要自行摸索最佳標記時間。按照每個樣 本的標記體積為 2 mL 計算 ,對應貨號 C331306E 和 C331306S 的試劑盒可分別進行 500 次和 1000 次檢 測。
產品規格
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貨號 |
C331306E/C331306S |
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規格 |
500 T/1000 T |
組分信息
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組分編號 |
組分名稱 |
C331306E |
C331306S |
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C331306-A |
CFDA-SE 熒光探針 |
1 管×2 |
1 管×4 |
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C331306-B |
CFDA-SE 溶劑 |
500 µL×2 |
500 µL×4 |
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C331306-C |
細胞染色緩沖液(5×) |
200 mL×1 |
200 mL×2 |
儲存條件
冰袋運輸。-20℃干燥避光保存 ,有效期 2 年。
注意事項
1. CFDA-SE 易被水解,在水溶液中會很快變質。因此保存過程中粉末或者儲存液都需干燥保存;而且使 用過程中避免接觸水。但在標記細胞的過程中和水接觸是允許的。
2. CFDA-SE 溶劑在 4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內 ,于 20-25℃ 水浴溫育片刻至全部融解后方可使用。
3. 不同的細胞由于其細胞內酯酶活性不同 ,染色效果具有差異性。
4. 雖然本試劑盒已對 CFDA-SE 染色體系做了優化處理 ,但建議使用者根據自身的細胞類型 ,培養條件 以及應用的不同來摸索最佳的工作濃度 ,以最低得到適宜標記效率的濃度為準。
5. 熒光染料均存在淬滅問題 ,染色過程需盡量避光。
6. 為了您的健康 ,實驗操作時請穿實驗服和戴一次性手套。
7. 本產品僅用于科研。
使用說明
1. CFDA-SE 儲存液(1000×) 的配制
加入 500 µL CFDA-SE 溶劑到 1 管 CFDA-SE 熒光探針中進行溶解 ,充分混勻即得到 1000×的儲存液。
【注意】該儲存液最好在 1 個月內使用完畢,最長不超過 2 個月。剩余儲存液請務必分裝后于≤-20℃避光 干燥保存 ,避免反復凍融 ,-70℃避光保存可適當延長保存周期。
2. 2×CFDA-SE 工作液的配制
取適當體積的細胞染色緩沖液(5×) , 用無菌的去離子水進行 5 倍稀釋 ,配制成 1×細胞染色緩沖液 ,并 利用該緩沖液對上述 CFDA-SE(1000×) 儲存液進行 500×稀釋,如取 2 μL CFSE 儲存液加入到 1 mL 1× 細胞染色緩沖液中 ,混勻后即可得到 2×CFDA-SE 染色工作液。
【注意】雖然本試劑盒已對 CFDA-SE 染色體系做了優化處理,但建議使用者根據自身的細胞類型,培養條 件以及應用的不同來梯度摸索最佳工作濃度 ,以最低得到適宜標記效率的工作濃度為準。
3. 操作步驟
1) 離心收集細胞,利用 1 mL 1×細胞染色緩沖液懸浮細胞于 15 mL 離心管,并調整細胞濃度為 1-5×106 個/mL;
2) 把 1 mL CFDA-SE 工作液(2×)加入到上述 15 mL 離心管內 ,輕輕混勻。
3) 37℃孵育 10 min。【注意】 對于不同細胞 ,需要自行摸索最佳標記時間。
4) 立即在 15 mL 離心管內加入約 10 mL 完全細胞培養液(含 10% FBS) ,室溫顛倒數下混勻 ,以終止標 記反應。
5) 室溫離心去上清 ,再用 5-10 mL 完全細胞培養液洗滌一次。
6) 再加入 5-10 mL 完全細胞培養液 ,37℃孵育 10 min ,以促進 CFSE【酯酶催化 CFDA-SE 得到的熒光 產物】在細胞內的駐留及未反應的 CFDA-SE 進入完全細胞培養液。離心去上清,完成最后一次洗滌。
7) 此時標記好的細胞已可進行后續的體外增殖檢測或者特定目的的細胞示蹤。按照正常方法培養細胞, 然后在合適的時間點用熒光顯微鏡或流式細胞儀【FL1 通道】 進行結果分析 ,呈綠色熒光。標記的細 胞也可用于活體動物的移植 ,并用熒光進行示蹤。
【注意】 若需要對細胞進行固定 ,請用醛類固定劑如 3.7%多聚甲醛于室溫固定 15 min;之后若還需要進 行其他如抗體標記 ,請用冰丙酮透化處理細胞 10 min。
