C58C1感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品名稱: C58C1感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱: C58C1感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品編號(hào): MCC0103
產(chǎn)品價(jià)格: null
產(chǎn)品產(chǎn)地: 中國(guó)
品牌商標(biāo): Frdbio
更新時(shí)間: 2023-09-13T15:57:22
使用范圍: 僅供科研使用
- 聯(lián)系人 : 趙經(jīng)理
- 地址 : 光谷國(guó)際B座1513
- 郵編 :
- 所在區(qū)域 : 湖北省
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C58C1感受態(tài)細(xì)胞
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產(chǎn)品編號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
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MCC0103 |
C58C1感受態(tài)細(xì)胞 |
100μl*10 |
保存條件:-80℃。
1. 產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
基 因 型Agrobacterium rhizogenes
(strR,rifR ) pRiA4b (agropinetype)
發(fā)根農(nóng)桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農(nóng)桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細(xì)菌,它能夠感染大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個(gè)別裸子植物。C58C1發(fā)根農(nóng)桿菌菌株含有pRiA4b農(nóng)桿堿型Ri質(zhì)粒,具有廣泛的宿主范圍(薔薇科,夾竹桃科,豆科,茄科,黃芩,煙草等),同時(shí)具有鏈霉素,利福平抗性。AngYuBio C58C1化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pCAMBIA2301質(zhì)粒(卡那霉素抗性)檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率>104 cfu/μg DNA。
2.使用說(shuō)明:
1.取100 μl感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中融化。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,靜置冰浴30min。
3.42℃熱擊45sec,然后快速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中靜置2-3min,該過(guò)程不要搖動(dòng)離心管。
4.每個(gè)離心管中加入450 μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床, 150 rpm振蕩培養(yǎng)45~60min使菌體復(fù)蘇。
5.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi),將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12~16h。
3.注意事項(xiàng):
1.感受態(tài)細(xì)胞最好在冰中緩慢融化,8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2.混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
*本試劑僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用
