普魯士藍染色原理

      普魯士藍染色（Perls stain）又稱含鐵血黃素染色，及經過亞鐵氰化鉀與稀酸反應呈現藍色；主要針對于三價鐵，是一種經典的組織化學反應，是顯示組織內三價鐵的一種敏感、傳統優良的方法；染色原理是亞鐵氰化鉀溶液使三價鐵離子從蛋白質中被稀鹽酸分離出來，三價鐵與亞鐵氰化鉀反應生成一種不溶解的藍色化合物，稱之為普魯士藍染色。三價鐵的亞鐵氰化物是一種穩定的化合物，反應后亦可用其他染色劑進行復染（核固紅，伊紅等）

普魯士藍應用

      普魯士藍常用于顯示組織內各種出血性病變，常見于吞噬細胞內，可用來觀察組織細胞中有無鐵元素存在，以及鐵元素存在的位置及含量。

在臨床檢測上的應用有：

① 顯示和證明組織內局部出血的各種出血性病變；

② 顯示慢性心衰時的肺淤血和心衰細胞（鐵陽性巨噬細胞)；

③ 證明和區分含鐵血黃素和其他色素沉著，注意正常骨髓和脾臟中常見被染色的三價鐵離子。

普魯士藍染色實驗步驟

1、石蠟切片脫蠟至水；

2、普魯士藍染色：染色液等比例混合，切片入染液中染色1h，蒸餾水洗2遍；

3、復染：核固紅染色3min，流水沖洗；

4、脫水封片：切片入無水乙醇 3 缸脫水，各 5min，二甲苯透明 5min，中性樹膠封片；

5、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。

注意事項

1、切片脫蠟應盡量干凈。組織固定常采用10%中性福爾馬林，經普通福爾馬林長期固定后，組織會有損傷。避免使用酸性固定劑，鉻酸鹽處理也會妨礙鐵的保存。

2、整個操作過程中容器要干凈，避免用金屬鐵制品，洗切片和容器時以蒸餾水為宜，因普通水內含鐵質。Perls stain 染色時，應根據樣本情況調整著色時間。

3、所有切片都應使用同一個陽性對照切片，選擇適合的對照非常重要。

結果判讀

鐵離子呈藍色，細胞核紅色

送樣運輸要求

樣本放置于10倍樣本體積的固定液中固定24h以上，常溫運輸（勿冷凍結冰）；

2. 石蠟切片常溫運輸，冰凍切片-20℃運輸。