牛痘病毒加帽酶檢測試劑盒
產(chǎn)品名稱: 牛痘病毒加帽酶檢測試劑盒
英文名稱: Vaccinia Capping Enzyme ELISA Kit
產(chǎn)品編號: 36709ES
產(chǎn)品價格: 詢價
產(chǎn)品產(chǎn)地: Yeasen
品牌商標(biāo): Yeasen
更新時間: 2025-07-17T13:04:48
使用范圍: null
- 聯(lián)系人 : 李自轉(zhuǎn)
- 地址 : 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄一號樓三層南單元
- 郵編 : 200030
- 所在區(qū)域 : 上海
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真核生物中mRNA經(jīng)轉(zhuǎn)錄后修飾在5'端形成一個特殊結(jié)構(gòu),即帽子結(jié)構(gòu),該結(jié)構(gòu)對mRNA的穩(wěn)定、轉(zhuǎn)運與翻譯過程均有較重要作用。牛痘病毒加帽酶是催化形成帽子結(jié)構(gòu)的有效酶,其由D1和D12兩個亞基組成,兼具RNA三磷酸酯酶活性、鳥苷酰基轉(zhuǎn)移酶活性和鳥嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶活性,可將7-甲基鳥嘌呤帽結(jié)構(gòu)(m7Gppp)連接到RNA的5'末端(m7Gppp5'N)。牛痘病毒加帽酶,在合適濃度的加帽緩沖液(Capping buffer),鳥苷三磷酸(GTP),S-腺苷甲硫氨酸(SAM)等存在條件下,能夠在一個小時之內(nèi)對RNA進(jìn)行加帽,并且保證正確的方向。本試劑盒應(yīng)用雙抗夾心酶聯(lián)免疫檢測(ELISA)的實驗原理進(jìn)行牛痘病毒加帽酶殘留量檢測,將牛痘病毒加帽酶標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本加入預(yù)包被抗牛痘病毒加帽酶抗體的酶標(biāo)板(36709-A),然后加入稀釋后的生物素標(biāo)記的牛痘病毒加帽酶檢測抗體(36709-C),最后加入Streptavidin-HRP(SA-HRP)(36709-D),形成抗體+抗原+抗體‐Biotin+ SA‐HRP 復(fù)合物,洗板后加入TMB顯色液(36709-H)顯色。TMB在HRP酶的催化下由無色轉(zhuǎn)化成藍(lán)色并在終止液(36709-I)的作用下最終轉(zhuǎn)化成黃色。黃色的深淺與樣本中被檢測到的牛痘病毒加帽酶的量呈正相關(guān)。
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檢測范圍
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0.125~8 ng/mL
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檢測方法
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雙抗夾心法
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檢測時長
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3.5小時
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靈敏度
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0.065 ng/mL
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稀釋線性
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與未稀釋樣品差異<20%
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回收率
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70%~130%
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板內(nèi)差
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<10%
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板間差
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<15%
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- 符合法規(guī):按照Chp、USP、ICHQ2(R2)等要求進(jìn)行全面驗證;
- 保障品質(zhì):包被和檢測抗體、標(biāo)準(zhǔn)品等原材料全自主研發(fā),可溯源;
- 配合審計:生產(chǎn)工藝穩(wěn)定,批間差可控,有完善的審計文件;
- 靈敏度高:定量下限(LLOQ)可達(dá)0.125 ng/mL,檢測下限(LLOD)低至0.065 ng/mL;
- 精密度高:批內(nèi)重復(fù)性高CV<10%,批間差異小即中間精密度CV<15%;
- 準(zhǔn)確性高:樣本加標(biāo)回收率均在70%~130%范圍內(nèi);
- 專屬性強(qiáng):向樣本中添加不同類型的干擾物,牛痘病毒加帽酶測試值未見顯著性差異;
- 穩(wěn)定性好:試劑盒在37℃條件下可穩(wěn)定放置7天,性能不受影響。
1. 檢測范圍
試劑盒線性范圍為0.125~8 ng/mL,R2=1.000,各濃度檢測值CV≤10%。標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果如下:
| 標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/mL) | 檢測平均值(ng/mL) | 回收率(%) | 濃度CV% |
| 8 | 7.995 | 99.9% | 3.6% |
| 4 | 4.014 | 100.4% | 3.8% |
| 2 | 1.996 | 99.8% | 6.1% |
| 1 | 0.976 | 97.6% | 2.4% |
| 0.5 | 0.508 | 101.6% | 8.1% |
| 0.25 | 0.273 | 109.1% | 9.0% |
| 0.125 | 0.124 | 99.3% | 8.7% |
| 0 | / | / | / |
2. 準(zhǔn)確度
向3種不同基質(zhì)樣本中等比例添加高中低三個濃度Vaccinia Capping Enzyme標(biāo)準(zhǔn)品,同時將高值添加的樣本做倍比稀釋。對倍比稀釋樣本,以及不同加標(biāo)濃度樣本,未加標(biāo)樣本中的Vaccinia Capping Enzyme進(jìn)行檢測,線性回收率和加標(biāo)回收率在80%-120%之間。結(jié)果如下:
加標(biāo)回收率=實測值/(加標(biāo)準(zhǔn)品×50%+加標(biāo)本值×50%)
| 樣本稀釋比例 | 實測值(ng/ml) | 稀釋線性 | 樣本加標(biāo) | 實測值(ng/ml) | 回收率 |
| 1× | 3.812 | / | S+Std2 | 3.812 | 94.5% |
| 2× | 2.036 | 106.8% | S+Std4 | 0.950 | 92.0% |
| 4× | 1.095 | 107.5% | S+Std6 | 0.229 | 81.0% |
| 8× | 0.593 | 108.4% | 未加標(biāo)樣品 | 0.064 | / |
| 16× | 0.307 | 103.6% | / | / | / |
2~8℃保存,未拆封有效期1年。
*收到貨后,請檢查各組分是否齊全,并立即放入對應(yīng)的保存溫度中儲存。
