8%預制膠(16元/板,可免費試用)
產品名稱: 8%預制膠(16元/板,可免費試用)
英文名稱: precast gel
產品編號: P01
產品價格: 0
產品產地: shanghai china
品牌商標: willget
更新時間: 2023-09-20T14:20:30
使用范圍: null
上海文淵閣生物科技有限公司
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Willget預制膠使用說明
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?????? 本預制膠為PH中性緩沖液制備,可長期存放(室溫一年,不可凍存)。本品既可進行天然蛋白電泳,也可進行變性蛋白電泳。電泳及轉膜緩沖液兼容傳統tris-glycine緩沖液,50分鐘完成電泳,使用方便,即開即用,蛋白條帶條帶清晰,并可實現接近100%轉膜。目前有膠濃度6%,8%,10%,12%,15%,8%-16%,4%-20%,4%-12%供您選擇。本預制膠兼容BIORAD,天能及北京六一的mini膠電泳槽及其他任何膠板寬度在10cm的電泳槽。
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預制膠規格 | 濃縮膠4%,丙烯酰胺與甲叉丙烯酰胺的比例29:1,凝膠厚度1mm,加樣孔數,12孔,最大上樣量30ul |
電泳說明 | 使用《分子克隆》指定的tris-glycine 電泳緩沖液(tris 25mM,glycine 250mM,SDS 0.1%,),推薦使用恒壓150v跑膠50min。客戶也可直接購買本公司的電泳轉膜通用緩沖液(12元/升) |
轉膜說明 | 使用《分子克隆》tris-glycine電轉緩沖液(包括濕轉及半干轉),操作與實驗室原有操作相同。(使用本公司電泳轉膜通用緩沖液,只需在電泳完成后緩沖液中添加20%乙醇即形成轉膜緩沖液,無需甲醇,無需冰浴,濕轉半干轉條件皆為恒壓70v電轉50min) |
保存方法 | 置于包裝盒中,室溫保存一年,整齊疊加平放,或整齊豎直放置。 |
使用簡介 | 剪開包裝取出膠,撕去膠板底端橙色膠紙,將預制膠固定在電泳槽中,內槽加滿緩沖液,外槽液面低于內槽液面5mm(或與內槽液面高度一致),將梳子平穩緩慢拔出,電泳后取出膠板,用小螺絲刀沿左右兩板間的縫隙將兩板別開,掰開兩板,用梳子邊緣將塑料板底端縫隙中的凝膠頂出。轉移凝膠時,將梳子一端插入凝膠下方,并用拇指按住凝膠,進行膠轉移。如需切割凝膠,可利用膠板的邊緣按壓切割凝膠。 |
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注意事項:
1.?電泳及電轉緩沖液建議使用新配制的緩沖液,試劑純度不夠,反復使用或長期放置過的緩沖液會降低電泳效果。如果自配的緩沖液不理想,可使用本公司電泳電轉通用緩沖液。
2.?電泳前請務必撕去膠板底端的橙色膠紙。
3. 由于新一代預制膠改進了BIORAD的mini膠板兩側上端與硅膠墊接觸的凹陷結構,使其兼容所有廠家的mini膠電泳槽。然而,這使得本預制膠對于BIORAD和天能的電泳內外槽存在微小泄露,可通過兩種方式解決本問題:一是內槽加滿緩沖液,外槽液面加至距內槽液面3-5mm,從而可防止在電泳過程中內槽液面逐步下降。另一種解決方式是將BIORAD的硅膠封閉墊取出后反過來安裝,使其沒有凸起的平滑面朝外,從而防止漏液。
5. 如果上樣緩沖液和電泳緩沖液中含有變性劑和還原劑,利用本預制膠可進行變性蛋白電泳。
6. 如果上樣緩沖液和電泳緩沖液中去除變性劑和還原劑,本預制膠可進行天然蛋白電泳,但要注意對于天然的堿性蛋白電泳,需將電源輸出線的正負極調換。
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問題與解決方案:
??????? 本產品為穩定性配方結合自動化裝備標準灌制形成,膠的本身質量穩定性很高,其泡沫包裝盒也可有效抵抗運輸過程產生的沖擊,但根據之前客戶端反饋,跑膠轉膜問題在客戶端主要出現在以下幾個方面:
首先,內外緩沖液液面沒有一樣高,內槽緩沖液泄漏后,形成電泳大幅扭曲,電泳時間大幅度延長,這一點可從溴酚藍扭曲看出。
??????? 其次,本預制膠PH為中性,對電泳緩沖液和上樣緩沖液的要求相比傳統PH8.8的膠要高,緩沖液配制不當,或長期放置變質,都會對本預制膠效果產生影響,如果自己配制的這兩個試劑與本產品附送的緩沖液相比,條帶較模糊,請重新按本說明書或《分子克隆》指定配方重新配制,也可直接購買文淵閣這兩個穩定型試劑。有兩個參數需要注意,一個是電壓150v電泳時,每板膠的電流30mA-55mA之間,隨著時間電流逐步會降低,濕轉70v時,電流大致在200Ma-300mA,隨著時間電流是逐步升高,如果您的電流遠不在這一范圍,需檢查緩沖液的質量和內外槽電泳液液面是否一樣平。
??????? 最后,在上樣時不可將槍頭過度插入上樣孔中,槍頭的過度插入會導致膠板形變,形成腔隙造成樣品向下泄露。另外,在把凝膠從板上取出時,最好用梳子邊緣將膠從板側縫隙中頂出,再將梳子從膠下插入,用拇指按住膠,進行轉移。這些操作是為了保證取膠時不形成膠上裂縫。
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