PICHIAPINK-2酵母感受態細胞

保存條件：-80℃。

1.使用說明：

1). 取需轉化質粒5µg，酶切，回收

2).取一支無菌的1.5ml EP管，依次加入預冷的線性質粒1-5 µg （體積不高于15 µl），酵母促轉化劑 10µl，100µl冰上融化的 PICHIAPINK-2感受態細胞，畢赤酵母轉化液 500µl，輕輕翻轉混勻6-8次

3).30℃ 水浴30min，每10min輕輕翻轉混勻6-8次;

4).每支加入20ul的二甲基亞砜

5).42℃水浴15min，每5min輕輕翻轉混勻6- 8次;

6).12000rpm瞬時離心棄上清,每支加入1m1的YPD Plus于30℃復蘇1h

7).12000rpm瞬時離心棄上清，用100ul 0.9% NaCl 重懸，涂板,30℃培養48 - 96h。

2.注意事項：

1).使用酵母促轉化劑前，請把裝有酵母促轉化劑的管子在沸水 中煮沸5min，然后立即放在冰上，用后放在-20℃儲存備用

2).轉化液低溫環境下會析出，請于常溫下完全溶解后使用

3).轉化全過程要無菌操作

*本試劑僅供實驗室研究使用