細胞毒實驗(MTT法)
產品名稱: 細胞毒實驗(MTT法)
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編號 ?實驗項目 種類 收費標準(元) 周期 XB-1 細胞培養 原代培養 面議 面議 XB-2 傳代培養 面議 面議 XB-3 細胞轉染 瞬時轉染 面議 面議 XB-4 穩定轉染 面議 面議 XB-5 藥物干擾 不同藥物濃度/種類 面議 面議 XB-6 細胞侵染 --------- 面議 面議 XB-7 細胞毒實驗? ---------- 面議 面議 XB-8 流式細胞術 單色標記 30元/樣 5個工作日 XB-9 細胞相關檢測 ELISA、Western?Blot、流式細胞儀、免疫沉淀、激光共聚焦、免疫熒光標記檢測等方法,檢測相關指標,詳見其他實驗服務項目。
MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲瓚,用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內,MTT結晶形成的量與細胞數成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。
?MTT實驗 ??????????下圖為用MTT法檢測藥效的折線圖 
樣品要求及注意事項:
1低溫運輸:干冰運輸:取對數生長期的細胞(細胞傳代后細胞匯合度達到80%時),用胰蛋白酶把單層生長的細胞消化下來,低速離心1000rpm,5min;棄掉上清(胰蛋白酶及舊的培養液),加入適量配制好的凍存液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,血球計數板計數,調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5?ml;在凍存管上標明細胞的名稱、細胞代次、凍存時間及操作者;放4℃冰箱30min,-20℃30min到1h,-80℃過液,然后放入液氮罐;?
2常溫運輸:細胞貼壁覆蓋瓶底面積達40%以上時,裝滿培養液,瓶口用封口膜封好,裝入盒子,盒子里用泡沫或棉花塞滿,讓瓶子固定在盒子中。
