由于 β-hydroxybutyrylation 修飾肽段含量低，需富集增強檢測靈敏度：

（1）抗組蛋白 β-羥基丁?；揎椀奶禺愋钥贵w富集（Immunoaffinity Enrichment）。

（2）串聯親和層析（TAP）或高 pH 反相預分級。

（3）TiO?、IMAC 等金屬氧化物富集對 Kbhb 不夠特異，謹慎選擇。

4、LC-MS/MS 分析參數設置

（1）色譜條件：使用 nanoLC 系統（如 EASY-nLC）結合 C18 納柱，實現高分辨率分離。

（2）質譜平臺：推薦使用 Orbitrap Fusion Lumos 或 timsTOF Pro，支持高分辨和精準定量。

（3）MS/MS 模式：DDA（數據依賴采集）或 DIA（數據無依賴采集），結合 PRM 精確驗證。

（4）碰撞方式：HCD（高能碰撞）適用于標記修飾肽的碎片信息獲取。

二、數據分析策略

1、數據搜索與修飾識別

（1）軟件：MaxQuant、Proteome Discoverer、Byonic。

（2）修飾設定：將 Kbhb（+86.0368 Da）作為可變修飾添加。

（3）FDR 控制：建議 <1%，確保鑒定可靠性。

2、修飾位點定位與定量

（1）定位置信度評分（如 PTM Score）。

（2）使用 MS1 強度進行 Label-free 定量，或 TMT/iTRAQ 標記多樣本比較。

3、生物信息學分析

（1）修飾位點分布與偏好序列分析。

（2）GO 富集分析：修飾組蛋白多關聯染色質重塑、轉錄調控。

（3）網絡分析：與轉錄因子、表觀調控酶的互作網絡構建。

三、技術難點與優化建議

在 LC-MS/MS 分析組蛋白 β-羥基丁酰化過程中，常見挑戰主要包括以下幾點：

1、修飾肽含量低

Kbhb 屬于低豐度修飾，直接檢測靈敏度不足。建議使用特異性抗體富集，并結合高靈敏質譜平臺提升檢出率。

2、酶解效率差

組蛋白堿性強、結構致密，常規胰酶切割不充分。推薦采用化學衍生法和多酶聯用策略，提高序列覆蓋度。

3、修飾類型易混淆

組蛋白 β-羥基丁?；c其他酰化修飾質量相近，易引發識別誤差。需依賴高分辨質譜與精確定位算法確保鑒定準確。

4、定量偏差大

樣本異質性和修飾變化顯著，易影響定量可靠性。建議設置足夠生物重復，并通過合理歸一化提升數據一致性。

百泰派克生物科技構建了從樣本制備、修飾富集、LC-MS/MS 檢測到多維數據分析的 一體化組蛋白修飾研究平臺：

• 搭載 Orbitrap Exploris 480 & timsTOF HT 等旗艦質譜設備。
• 專有組蛋白衍生酶解流程，覆蓋率高、重復性好。
• 可檢測包括 Kbhb、Kac、Kme、Kcr 等在內的 30+ 種組蛋白修飾。
• 提供定制化多組學整合服務，深入揭示表觀調控機制。

LC-MS/MS 是研究組蛋白 β-羥基丁酰化修飾的黃金標準技術。通過科學的樣本處理、精準的修飾富集和高分辨率質譜分析，研究者可系統探索該修飾在基因調控和疾病發生中的關鍵作用。如您正在探索表觀遺傳調控機制、代謝相關疾病機制或新型組蛋白修飾的功能研究，歡迎聯系百泰派克獲取定制化質譜服務方案。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對蛋白質序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對蛋白質的氨基酸組成分析，N端測序，C端測序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白質N端序列分析服務。對于未知理論序列的蛋白質，提供基于從頭測序法的蛋白質從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優勢：

1.采用目前世界上先進的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、蛋白質組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量蛋白質組學、靶向蛋白質組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白質組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析，發現新的生物標記物;

2.體內體外多種蛋白質標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.專業生物信息學分析，分析更系統準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，最后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。

※服務優勢：

1.技術先進，填補技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現了數量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從最小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從蛋白質、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務，幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等專業服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數據冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，專業提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務；

3.業務范圍覆蓋蛋白質組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!

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