OverExpress C43(DE3)感受態細胞

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1.產品簡介：

本產品是采用大腸桿菌OverExpress C43(DE3)感受態細胞菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞。OverExpress C43(DE3)?菌株具有很強的表達毒性蛋白和疏水性蛋白的能力，可用于pET系列，pGEX，pMAL等質粒的蛋白表達。

基因型：F–ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)

特點：1．OverExpress C41(DE3)、OverExpress C41(DE3)均起源于?BL21(DE3)?，可以高效表達毒性蛋白或疏水性蛋白。OverExpress C41(DE3)跟BL21(DE3)的區別在于其基因組含有至少一個未知突變，這個未知突變使其獲得了高效表達毒性蛋白?(1-5)的能力，此突變位點參與大腸桿菌表達毒性蛋白時的細胞死亡途徑。2．OverExpress C43(DE3)是通過篩選OverExpress C41(DE3)對另一個不同毒性蛋白的抗性菌株獲得。所以OverExpress C43(DE3)?菌株與?BL21(DE3)相比擁有至少兩個未知突變，正是這兩個未知突變使其獲得了更廣泛的表達毒性蛋白或疏水性蛋白的能力。pUC19質粒檢測，轉化效率可達108cfu/μg DNA。

2.使用說明：

1．取100 μl感受態細胞置于冰浴中融化。

2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30min。

3．42℃熱擊45sec，然后快速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3min，該過程不要搖動離心管。

4．每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，?150 rpm振蕩培養45～60min使菌體復蘇。

5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12~16h。

3.注意事項：

1．剛化凍的細胞轉化效率最高，避免反復化凍。

2．質粒質量和濃度等的差異會使轉化效率有所下降。

*本試劑僅供實驗室研究使用