RT-PCR及質粒載體構建技術服務
產品名稱： RT-PCR及質粒載體構建技術服務
英文名稱： RT-PCR
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北京凱諾春天生物科技有限公司
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一、RT-PCR擴增目的基因：
1、提取目的細胞或組織的總RNA，并將其反轉錄成cDNA；
2、采用普通PCR擴增得到目的基因（對于片段較長或在細胞中表達量較低的基因，采用巢式PCR進行擴增）；
3、將目的基因克隆到T載體上，并進行測序鑒定（如客戶需要克隆到其他載體上，需要提供載體，可直接將目的基因克隆到相應載體上）；
二、半定量RT-PCR（一般用于目的基因表達改變的檢測）：
1、提取目的細胞或組織的總RNA，并將其反轉錄成cDNA；
2、采用普通PCR擴增內參（b-actin或GAPDH），調整擴增循環數，使其處于對數擴增期；調整內參，使其保持一致；
3、普通PCR擴增目的基因，并通過圖像分析軟件分析目的基因與內參表達量的比例；
4、統計分析；
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