NMY51?酵母感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品名稱： NMY51?酵母感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱： NMY51?酵母感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品編號(hào)： MCC0213
產(chǎn)品價(jià)格： null
產(chǎn)品產(chǎn)地： null
品牌商標(biāo)： Frdbio
更新時(shí)間： 2024-03-01T10:50:35
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 : 趙經(jīng)理
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- 所在區(qū)域 : 湖北省
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NMY51 酵母感受態(tài)細(xì)胞
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產(chǎn)品編號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
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MCC0213 |
NMY51 酵母感受態(tài)細(xì)胞 |
100μl*10 |
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Carrier DNA |
5ug/μl；100 μl /-20℃ |
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PEG/LiAc |
5 ml /4℃ |
保存條件：-80℃。
1.產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
DUAL membrane系統(tǒng)是專門(mén)篩選跨膜蛋白間相互作用的檢測(cè)技術(shù)， 它利用分離的泛素系統(tǒng) 直接檢測(cè)天然狀態(tài)下膜蛋白間的相互作用的酵母雙雜系統(tǒng)。此系統(tǒng)采用NMY51酵母菌株，可直接轉(zhuǎn)化質(zhì) 粒進(jìn)行蛋白互作驗(yàn)證或篩庫(kù)試驗(yàn)；此菌株Transformation marker為：trp1，leu2-3，報(bào)告基因?yàn)椋篐IS3，ADE2和 lacZ， 第一步通過(guò)營(yíng)養(yǎng)缺陷型報(bào)告基因 (HIS3，ADE2)進(jìn)行選擇性生長(zhǎng) 篩選，進(jìn)一步通過(guò) LacZ報(bào)告基因進(jìn)行β-半乳糖分析顯色的定 量或半定量篩選，三個(gè)獨(dú)立的報(bào)告基因，受不同啟動(dòng)子的調(diào)控， 降低假陽(yáng)性幾率。此系統(tǒng)可使用四種Bait質(zhì)粒：pBT3-N，pBT3- C，pBT3-SUC，pBT3-STE，篩選標(biāo)志均為L(zhǎng)EU；四種Prey質(zhì)粒： pPR3-C，pPR3-N，pPR3-SUC，pPR3-STE，篩選標(biāo)志均為T(mén)RP。 NMY51感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pGADT7質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率 >104cfu/μg DNA
基因型：MATahis3200trp1-901leu2-3,112ade2LYS2::(lexAop)4- HIS3ura3::(lexAop)8-lacZade2::(lexAop) 8-ADE2 G
2.使用說(shuō)明：
1).取一支無(wú)菌的1.5ml EP管，依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒1-3μg, Carrier DNA 10μl(95-100℃ 5min快速冰浴，重復(fù)一次)，100μl冰.上融化的NMY51感受態(tài)細(xì)胞，PEG/LiAc 500ul， 輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;
2).30℃ 水浴30min，每10min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;
3).每支加入20ul的二甲基亞砜; (用于提高轉(zhuǎn)化效率，可不做)
4).42℃水浴15min，每5min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6- 8次;
5).12000rpm瞬時(shí)離心棄上清,每支加入1m1的YPD Plus于30℃復(fù)蘇1h; (用于提高轉(zhuǎn)化效率， 可不做)
6).12000rpm瞬時(shí)離心棄上清，用100ul 0.9% NaCl 重懸，涂板,30℃培養(yǎng)48 - 96h。
3.注意事項(xiàng)：
1).感受態(tài)細(xì)胞最好在冰上融化。
2). PEG溶液在低溫環(huán)境下會(huì)析出，請(qǐng)于常溫下完全溶解后使用。
*本試劑僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用