EBY100酵母感受態細胞

保存條件：-80℃。

1.產品簡介：

EBY100菌株是釀酒酵母菌株，屬于真核細胞。一般的針對原核生物的抗生素例如卡那和氨芐對酵母是無效的，因此為了防止大腸桿菌等原核生物對酵母培養菌株污染，往往會在培養基中加入一些氨芐和卡那霉素的抗生素，來抑制細菌的污染和生長。EBY100感受態細胞經特殊工藝制作，-80℃可保存3個月，pYD1質粒檢測轉化效率>10⁴cfu/ug DNA

基因型：MATα ura3-52 trp1 leu2?1 his3?200 pep4::HIS3 prb1?1.6R can1 GAL (pIU211)

2.使用說明：

1).取一支無菌的1.5ml EP管，依次加入預冷的目的質粒1-3μg, .Carrier DNA 10μl(95-100℃ 5min快速冰浴，重復一次)，100μl冰.上融化的EBY100感受態細胞，PEG/LiAc 500ul， 輕輕翻轉混勻6-8次;

2).30℃ 水浴30min，每10min輕輕翻轉混勻6-8次;

3).每支加入20ul的二甲基亞砜; (用于提高轉化效率，可不做)

4).42℃水浴15min，每5min輕輕翻轉混勻6- 8次;

5).12000rpm瞬時離心棄上清,每支加入1m1的YPD Plus于30℃復蘇1h; (用于提高轉化效率， 可不做)

6).12000rpm瞬時離心棄上清，用100ul 0.9% NaCl 重懸，涂板,30℃培養48 - 96h。

3.注意事項：

1).感受態細胞最好在冰上融化.

2).PEG溶液在低溫環境下會析出，請于常溫下完全溶解后使用。

*本試劑僅供實驗室研究使用