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原位雜交

實驗技術服務

原位雜交原理：
??? 原位雜交組化（簡稱原位雜交，in situ hybridization histochemistry；ISHH）屬于分子雜交的一種，是一種應用標記探針與組織細胞中的待測核酸雜交，再應用標記物相關的檢測系統(tǒng)，在核酸原有的位置將其顯示出來的一種檢測技術。原位雜交的本質(zhì)就是在一定的溫度和離子濃度下，使具有特異序列的單鏈探針通過堿基互補規(guī)則與組織細胞內(nèi)待測的核酸復性結合而使得組織細胞中的特異性核酸得到定位，并通過探針上所標記的檢測系統(tǒng)將其在核酸的原有位置上顯示出來。

探針的種類按所帶標記物可分為同位素標記探針和非同位素標記探針兩大類。同位素標記物雖然有靈敏性高，背底較為清晰等優(yōu)點，但是由于放射性同位素對人和環(huán)境均會造成傷害，近來有被非同位素取代的趨勢。非同位素標記物中目前最常用的有生物素、地高辛和熒光素三種。
?? 探針的種類按核酸性質(zhì)不同又可分為DNA探針、cDNA探針、cRNA探針和合成寡核苷酸探針。cDNA探針又可分為雙鏈cDNA探針和單鏈cDNA探針。原位雜交又可分為菌落原位雜交和組織原位雜交。菌落原位雜交（Colony in situ hybridization）是將細菌從培養(yǎng)平板轉移到硝酸纖維素濾膜上，然后將濾膜上的菌落裂菌以釋出DNA。將DNA烘干固定于膜上與32P標記的探針雜交，放射自顯影檢測菌落雜交信號，并與平板上的菌落對位。組織原位雜交（Tissue in situ hybridization）組織原位雜交簡稱原位雜交，指組織或細胞的原位雜交，它與菌落的原位雜交不同。菌落原位雜交需裂解細菌釋出DNA，然后進行雜交。而原位雜交是經(jīng)適當處理后，使細胞通透性增加，讓探針進入細胞內(nèi)與DNA或RNA雜交。
主要器材
醫(yī)用微波爐，恒溫水浴箱、濕盒、PNP筆等。
客戶需知：

實驗條件：切片機(石蠟和冰凍)?????????????????????????? 交貨時間：10－20天

結果提供：實驗組玻片和1張雜交陽性信號的數(shù)碼照片

客戶提供：1)樣本：組織、細胞或切片、細胞爬片
?????????????? 2)探針或基因資料(可由本公司代為設計(免費)，并合成與標記)

樣本要求：DNA原位雜交：組織及時固定
?????????????? RNA原位雜交：所有試劑和樣本容器包括固定液均用0.1%DEPC水處理24h，并高?? 壓滅菌；組織離體后30min內(nèi)及時固定，或-70℃以下凍存。

辦公地址：

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? ? ? ? ? 重慶市高新區(qū)高科創(chuàng)業(yè)園D棟，郵編：400000

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中試基地：
重慶兩江新區(qū)水星科技發(fā)展中心B座
第三軍醫(yī)大學新藥研發(fā)中心
上海張江高科園區(qū)蔡倫路781號
網(wǎng)址：www.cqwestern .com??????? 郵箱：china-western@163.com
全國免費電話：400-675-6758?????
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