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土壤基因組DNA提取試劑盒
貨號：D2600
規格：50T/ 100T
保存：室溫(15℃-25℃) 干燥保存，復檢期12個月，2℃-8℃保存時間更長。
試劑盒內容：
D2600-50T
D2600-100T
溶液A
25ml
50ml
溶液B
3ml
6ml
溶液C
5ml
10ml
溶液D
10ml
20ml
漂洗液
15ml
15ml×2
洗脫液
10ml
20ml
吸附柱
50個
100個
收集管
50個
100個
PCR增強劑
500ul
1ml
說明書
1份
1份
注：試劑盒開封后溶液A、B、C、D需在2-8℃保存。PCR增強劑-20℃保存。
產品簡介:
本試劑盒適合于從褐土、淤泥、火山灰等各種極端土壤環境中提取微生物DNA。對土壤中各種細菌、真菌有很好裂解效果，最大限度的保留了微生物DNA的多態性。
本試劑盒采用我公司特有的腐殖質吸附材料，可高效專一的去除各種腐殖質成分而絲毫不會影響DNA的產率，純度較酚、氯仿抽提法提高數倍。
使用本試劑盒提取的DNA產量大、完整性好，可直接用于各種常規操作，包括酶切、PCR 、文庫構建、Southern 雜交等實驗。
操作步驟：
使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。 1、稱取土壤樣本0.1-0.5g，在液氮中充分研磨成細粉末，加入450ul 溶液A 震蕩混勻。
* 也可直接稱取樣本 0.1-0.5g 于離心管(建議使用 2ml 圓底管)，加入 450ul 溶液 A 劇烈震蕩混勻1-2min 至沒有固體塊。使用液氮研磨效果最佳。
2、加入50ul 溶液B 充分顛倒混勻( 不要劇烈震蕩)，65℃水浴6min，每2min充分顛倒混勻一次。
3、加入100ul 溶液C 充分顛倒混勻( 不要劇烈震蕩)，12000rpm離心10min 。
4、將上清轉移到新的離心管，12000rpm離心2min 。
5、在吸附柱中加入200ul 溶液D ，將離心后的上清加入到帶有溶液D 的吸附柱中，用移液器吹吸幾次混勻，12000rpm離心1min。
6、將收集管中的濾出液混勻后重新吸入吸附柱( 必須)，12000rpm離心1min。
7、倒掉收集管中的廢液，在吸附柱中加入漂洗液500ul，12000rpm離心1min。
8、倒掉收集管中的廢液，重復步驟7 兩次(共漂洗三次)。
9、倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管，12000rpm離心2min 。
10、拿出吸附柱在室溫干燥數分鐘( 因季節及氣候等因素不等)，或50℃干燥1min。
11、將吸附柱放入一個新的離心管中，加入50-100ul 洗脫液(65 ℃預熱)，12000rpm離心1min。
12、將離心管中的液體重新加入到吸附柱中，12000rpm離心1min。離心管中即為土壤微生物DNA 溶液。
13、若產物PCR效果差，可以適當稀釋DNA產物，或添加1/10體積的PCR增強劑。
注意事項:
1、新鮮的土壤樣本會得到更高的產率，不同樣本在采樣前應先查閱相應的最佳保存條件。
2、若溶液中出現渾濁可在37℃水浴中溶解片刻至清澈，不會影響結果。
3、在需要吸取上清液的步驟中應避免吸到沉淀，否則會堵塞吸附柱，并影響產物純度。
4、洗脫緩沖液的體積最好不少于50ul ，體積過小會影響回收效率；建議使用試劑盒附帶的洗脫緩沖液，用水洗脫也會損失部分產物；DNA應保存在-20 ℃避免反復凍融，以防降解。
5、若產物含有腐殖質殘余則會嚴重影響DNA的光吸收值，應采取電泳檢測和分光光度計檢測相結合的方式鑒定。
6、液體試劑避免接觸皮膚，若意外接觸應立即使用大量清水沖洗。
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