TB1 感受態細胞

保存條件：-80℃。

1.產品簡介：

本產品是采用大腸桿菌TB1感受態細胞菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞。適合NEB公司的pMAL系列質粒原核蛋白表達，不能用于PET系列質粒的表達。

基因型：F– ara Δ(lac-proAB) rpsL (Strr)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15] thi hsdR

特點：TB1菌株源于JM 83，是JM 83 hsdR型菌株，只含有大腸桿菌RNA polymerase，缺少BL21 (DE3)菌株的T7 RNA polymerase，適合NEB公司的pMAL 系列質粒原核蛋白表達，不能用于pET系列質粒的表達。具鏈霉素抗性。pUC19質粒檢測，轉化效率可達108cfu/μg DNA。

2.使用說明：

1．取100 μl感受態細胞置于冰浴中融化。

2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30min。

3．42℃熱擊45sec，然后快速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3min，該過程不要搖動離心管。

4．每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床， 150 rpm振蕩培養45～60min使菌體復蘇。

5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12~16h。

3.注意事項：

1．剛化凍的細胞轉化效率最高，避免反復化凍。

2．整個動作要輕柔。

3．質粒質量和濃度等的差異會使轉化效率有所下降。

*本試劑僅供實驗室研究使用