貨號：P2060

規格：1000U（200μL）

產品簡介：

rTEV蛋白酶(重組型)是經過基因工程改造后的重組蛋白酶，該酶特異性識Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe- Gln-Gly七氨基酸序列。rTEV蛋白酶與腸激酶U(EK)、Thrombin、FactorXa、SUMO等蛋白酶相比，具有高活性、高特異性的雙重特點，rTEV蛋白酶因具高剪切活性和特異性，已成為融合蛋白表達后去除融合tag的首選蛋白酶。該酶經6×His標簽純化而得(含組胺酸標簽)，純度達99％，剪切反應完畢后可通過His標簽純化樹脂Ni-NTA Resin(Cat.No. P2010)去除。

產品內容：

保存條件：

rTEV蛋白酶-80℃長期保存，可存儲2年；首次使用后可置于-20℃保存，可儲存6個月，避免反復凍融。250×rTEV Protease Buffer可置于-20℃保存。

酶活定義：

在1×rTEV Protease Buffer中，30℃反應1h，剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定義為一個活性單位。

使用方法說明：

1.?推薦使用溶液：50 mM NaH₂PO₄, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM?DTT, 10%甘油，pH 8.0 buffer中進行剪切。

2.?250×rTEV Protease Buffer：250mM EDTA, 250 mM DTT, PH 8.0

3.?rTEV蛋白酶與需要酶切的目的蛋白比例：1：100

4.?酶切體系：

融合蛋白??????? 1000 μg

250×rTEV Protease Buffer?????? 4μL

rTEV蛋白酶?? 2μL

定容至 1000μL

定容緩沖液：50 mM NaH₂PO₄, 150mM NaCl

5.?酶切條件：在16℃酶切6hr。用戶可以根據自己研究的目的蛋白進行摸索酶切條件，可適當加大酶量或延長酶切時間。

6.?可取少量樣本進行SDS-PAGE分析，若要去除酶切后體系中的rTEV蛋白酶，可用His標簽純化樹脂親和層析。

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