Calcein, AM
    　　CAS#：148504-34-1
    　　中文名：3'-O-乙酰胺-2',7'-二(羧乙基)-4或5-羧基熒光素,二乙酰甲酯
    　　英文名：3',6'-Di(O-acetyl)-4',5'-bis[N,N-bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoxymethyl ester
    　　別名：鈣黃綠素乙酰甲酯
        分子式：C46H46N2O23
    　　分子量：994.86
    　　性質：
    　　1. 外觀：白色或淺黃色晶體
    　　2. 純度：≥90%(HPLC)
    　　3. 產品描述：
    　　Calcein, AM是一種可對活細胞進行熒光標記的細胞染色試劑，它穿透細胞膜進入細胞后被細胞內的酯酶剪切形成Calcein，從而被滯留在細胞內，發出強綠色熒光。與其它同類試劑(如BCECF, AM和CFDA)相比，Calcein, AM的細胞毒性很低。Calcein的激發和發射波長分別為490 nm和515 nm。
    　　Calcein, AM僅對活細胞染色。作為核染色染料的PI不能穿過活細胞的細胞膜，它穿過死細胞膜的無序區域而到達細胞核，并嵌入細胞的DNA雙螺旋從而產生紅色熒光(激發：535 nm，發射：617 nm)，因此PI僅對死細胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發，因此可用熒光顯微鏡同時觀察活細胞和死細胞。用545 nm激發，僅可觀察到死細胞。根據以上特點，Calcein, AM和PI經常被結合用來作為活細胞和死細胞的雙重染色。
    　　由于不同細胞系的最佳染色條件不同，我們建議個別確定Calcein, AM和PI的合適濃度。
    　　4. 使用方法
    　　(1)用DMSO制備1 mM 的Calcein, AM溶液，并用PBS將其稀釋制成1～50 μM的Calcein, AM溶液。注：如果Calcein, AM很難進入細胞，可以使用表面活性劑，如Pluronic F127。
    　　(2)將1/10細胞培養基體積的Calcein, AM溶液加入到細胞培養基中。注：也可以用1/10濃度的Calcein, AM溶液代替培養基。
    　　(3)在37℃培養細胞15～30分鐘。
    　　(4)用PBS或適當的緩沖液洗滌細胞兩次。
    　　(5)用490 nm激發波長，515 nm發射波長的濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞。

    　　儲存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。