E.coli Poly(A) Polymerase?
產品名稱： E.coli Poly(A) Polymerase?
英文名稱： E.coli Poly(A) Polymerase?
產品編號： Frd00026
產品價格： 100u/2000
產品產地： null
品牌商標： Frdbio
更新時間： 2023-12-26T14:25:11
使用范圍： null
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E.coli Poly(A) Polymerase 產品說明書
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產品名稱 |
產品貨號 |
規格 |
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E.coli Poly(A) Polymerase (5 U/μL) |
Frd00026 |
100U/1000u |
產品概述
E.coli Poly(A) Polymerase，即E.coli Poly(A)聚合酶，能以不依賴于模板的方式催化ATP以AMP的形式依次摻入到RNA 3'末端。E.coli Poly(A)聚合酶能以各種RNA單鏈為底物，不能以DNA為底物，雙鏈RNA以及過短的寡聚核苷酸不推薦作為加尾反應的底物。E.coli Poly(A)聚合酶具有很高的加尾效率，可以在RNA的3´末端加入20~200個A堿基。
保存及運輸條件
-30~-15℃保存，干冰運輸。
產品基本信息
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產品名稱 |
E.coli Poly(A) Polymerase |
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來源 |
E.coli |
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活性 |
5 U/μL |
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儲存緩沖液 |
20 mM Tris-HCl, 300 mM NaCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 50% Glycerol, 0.1% Triton X-100 (pH 7.5, 25°C) |
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儲存條件 |
-20℃ |
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加尾緩沖液（1X） |
50 mM Tris-HCl (25℃, pH 7.8), 250 mM NaCl, 10 mM MgCl2 |
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酶活定義 |
37℃，pH 8.0條件下，10分鐘內將1 nmol AMP摻入RNA所需要的酶量定義為1個活性單位 |
產品應用
1、為RNA添加Poly(A)尾，用于反轉錄后克隆或親和純化。
2、用于RNA 3´末端標記。
3、增加mRNA穩定性，提高mRNA在真核細胞中的翻譯效率
使用方法
1、反應體系
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組分 |
體積（μL） |
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10 × Poly(A) Polymerase Buffer |
2 μL |
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ATP (10 mM) |
1 μL |
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RNase Inhibitor (40 U/μL) |
0.5 μL |
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RNA |
10 μg |
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PAP |
0.2-1 μL |
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RNase Free Water |
Up to 20 μL |
2、反應條件
37℃反應30 min-1 h。加入EDTA至終濃度10 mM或者65°C，20 min終止反應。
注意事項
1、Poly(A)加尾長度與E.coli Poly(A) Polymerase酶量、ATP量和反應時間有關。
2、E.coli Poly(A) Polymerase需要有Mg2+等二價離子才能發揮活性。
3、E.coli Poly(A) Polymerase將AMP添加到RNA的3´末端具有較高的選擇性，并不會在所有RNA分子中添加相同長度的Poly(A)。
僅供科研實驗使用