ArcticExpress(DE3)RP感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品名稱： ArcticExpress(DE3)RP感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱： ArcticExpress(DE3)RP感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品編號(hào)： MCC0095
產(chǎn)品價(jià)格： null
產(chǎn)品產(chǎn)地： 中國(guó)
品牌商標(biāo)： Frdbio
更新時(shí)間： 2023-09-13T15:50
使用范圍： 僅供科研使用
- 聯(lián)系人 : 趙經(jīng)理
- 地址 : 光谷國(guó)際B座1513
- 郵編 :
- 所在區(qū)域 : 湖北省
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ArcticExpress(DE3)RP感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
MCC0095 | ArcticExpress(DE3)RP 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl*10 |
pUC19（control vector） | 10pg/μl；10μl |
保存條件：-80℃。
1.產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
本產(chǎn)品是采用大腸桿菌ArcticExpress(DE3)RP感受態(tài)細(xì)胞菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞。ArcticExpress細(xì)胞可以解決細(xì)菌基因表達(dá)中常見(jiàn)的蛋白質(zhì)不溶解障礙。
基因型：E.coliBF–ompThsdS(rB–mB–) dcm+ Tetr gal λ(DE3) endAHte [cpn10 cpn60 Gentr] [argUproLStrr]
特點(diǎn)：1．ArcticExpress(DE3)RP衍生自高性能BL21-Gold感受態(tài)細(xì)胞，在被改造后擁有了許多額外的基因片段，這些片段可以表達(dá)出那些稀有的tRNA，使異源蛋白質(zhì)在大腸桿菌中高效高水平地表達(dá)。2．可以表達(dá)對(duì)低溫適應(yīng)的伴侶蛋白Cpn10和Cpn60（來(lái)自于嗜冷菌，Oleispiraantarctica）。3．提高富含GC-的真核基因在原核系統(tǒng)中的表達(dá)水平。無(wú)論是使用DE3溶素原菌株的T7啟動(dòng)子，或可誘導(dǎo)的IPTG，還是使用非DE3溶素原菌株的非T7啟動(dòng)子，ArcticExpress菌株都可用于重組蛋白的表達(dá)。具鏈霉素抗性。pUC19質(zhì)粒檢測(cè)，轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108cfu/μg DNA。
2.使用說(shuō)明：
1．取100 μl感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中融化。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30min。
3．42℃熱擊45sec，然后快速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3min，該過(guò)程不要搖動(dòng)離心管。
4．每個(gè)離心管中加入450 μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床， 150 rpm振蕩培養(yǎng)45～60min使菌體復(fù)蘇。
5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi)，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)， 37℃培養(yǎng)12~16h。
3.注意事項(xiàng)：
1．剛化凍的細(xì)胞轉(zhuǎn)化效率最高，避免反復(fù)化凍。
2．整個(gè)動(dòng)作要輕柔，質(zhì)粒質(zhì)量和濃度等的差異會(huì)使轉(zhuǎn)化效率有所下降。
*本試劑僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用