ArcticExpress(DE3)RP感受態細胞

保存條件：-80℃。

1.產品簡介：

本產品是采用大腸桿菌ArcticExpress(DE3)RP感受態細胞菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞。ArcticExpress細胞可以解決細菌基因表達中常見的蛋白質不溶解障礙。

基因型：E.coliBF–ompThsdS(rB–mB–) dcm+ Tetr gal λ(DE3) endAHte [cpn10 cpn60 Gentr] [argUproLStrr]

特點：1．ArcticExpress(DE3)RP衍生自高性能BL21-Gold感受態細胞，在被改造后擁有了許多額外的基因片段，這些片段可以表達出那些稀有的tRNA，使異源蛋白質在大腸桿菌中高效高水平地表達。2．可以表達對低溫適應的伴侶蛋白Cpn10和Cpn60（來自于嗜冷菌，Oleispiraantarctica）。3．提高富含GC-的真核基因在原核系統中的表達水平。無論是使用DE3溶素原菌株的T7啟動子，或可誘導的IPTG，還是使用非DE3溶素原菌株的非T7啟動子，ArcticExpress菌株都可用于重組蛋白的表達。具鏈霉素抗性。pUC19質粒檢測，轉化效率可達108cfu/μg DNA。

2.使用說明：

1．取100 μl感受態細胞置于冰浴中融化。

2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30min。

3．42℃熱擊45sec，然后快速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3min，該過程不要搖動離心管。

4．每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床， 150 rpm振蕩培養45～60min使菌體復蘇。

5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養， 37℃培養12~16h。

3.注意事項：

1．剛化凍的細胞轉化效率最高，避免反復化凍。

2．整個動作要輕柔，質粒質量和濃度等的差異會使轉化效率有所下降。

*本試劑僅供實驗室研究使用