小鼠Crk樣蛋白ELISA北京檢測/小鼠CRKL ELISA血清代測-免疫學檢測-試劑-生物在線
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小鼠Crk樣蛋白ELISA北京檢測/小鼠CRKL ELISA血清代測

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產品名稱: 小鼠Crk樣蛋白ELISA北京檢測/小鼠CRKL ELISA血清代測

英文名稱: Crk Like Protein (CRKL)小鼠

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產品產地: 加拿大/中國

品牌商標: 北京方程

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小鼠Crk樣蛋白ELISA北京檢測/小鼠CRKL ELISA血清代測

用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:?

  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。?

  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。?

  3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。?

  4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。?

  5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。?

  6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔O·D值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

小鼠Crk樣蛋白ELISA北京檢測/小鼠CRKL ELISA血清代測
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Elisa實驗常用方法:?
雙抗體夾心法測定抗原?
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將抗原免疫第一種動物獲得的抗體吸附于固相表面;
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加抗原,形成抗原-抗體復合物;?
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加抗原免疫第二種動物獲得的抗體,形成抗體抗原抗體復合物;
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加酶標抗抗體(第二種動物抗體的抗體);?
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加底物。底物的降解量=抗原量
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