濃縮脫鹽離心柱

保存條件：RT。

一．產品介紹

濃縮脫鹽離心柱 ,填料顆粒粒徑在 57-80微米,適合將分子量在 5KD以下的和分子量 5KD以 上的物質分離開來,對鹽和小分子的滯留率在 95%以上,幾乎等體積回收,樣品不會被稀釋,可以在出色地完成蛋白質脫鹽的同時保持極高的回收率。無需裝柱,代替比較耗時的傳統透析處理,以達到快速純化蛋白質替換蛋白質緩沖液的目的。只需簡單的幾次離心,即可完成樣品的脫鹽或緩沖液置換實驗。

二．產品用途

1、 脫鹽

2、 置換緩沖液

三．產品規格

柱體積0.7毫升;上樣量:150-200微升

四．工作環境

pH:2-13;溫 度:4-30℃

五．產品特點

1、 操作方便,免去了繁瑣的透析過程,15分鐘內即可完成樣品處理:

2、 建議一次性使用 (也可再生后重復使用),穩定性好,在所有常用緩沖液體 (PBS,Tris-HCl、 碳酸鈉一碳酸氫鈉等)中穩定。

3、 使用靈活,可根據自身樣品體積來適當增減柱體積。

六．操作步驟

1、 加入 600 ul緩沖液溶脹干粉裝填料,約 3分鐘。

2、 1200× g離 心 3min。 再加入 200u1上 述緩沖液,重復上述平衡操作 2次 。

3、 樣品處理。加入需要處理的蛋白樣品 (150-200 ul),靜置 30S,1200× g離 心 3min,收集回收樣品,保存備用。

4、 脫鹽柱的再生和保存

1)、 脫鹽蛋白后再生:將使用過的脫鹽柱,共 4次加入 200 ul含 2M NaC1的 PBS溶液,靜置 2min, 1200× g離心 3min。 然后 3次加入 200 uI去離子水,靜置 2min,1200× g離心 3min。

2)、 脫鹽小分子染料后再生:用20%乙醇溶液不斷加入脫鹽柱,直至染料完全清洗干凈后,再用去離子水或緩沖液清洗即可。

3)、 再生后用于不同蛋白:將使用過的脫鹽柱，加入 200 ul含 0.5M NaOH溶液 ,靜置 2min,1200 ×g離心 3min。 重復此操作 2-4次 。然后再用去離子水或緩沖液清洗至無NaOH即可。

將處理好的脫鹽柱 ,加 入 20%乙醇溶液,保存即可。

六．回收效果

樣品脫鹽后的回收率與樣品的濃度.以及上樣體積相關。樣品濃度越高,其回收率越高;同時在推薦的樣品上樣量范圍內,上樣量越大,其回收率也會隨之升高。通常脫鹽后蛋白的回收率在 80-95%。

七．注意事項

1、 樣品處理量要在柱子處理范圍內,過多會導致脫鹽不完全,過少會導致樣品回收率下降

2、 填料在高濃度醇溶液或飽和鹽溶液中會有失水收縮現象,請勿將上述溶液進行過柱;

3、 加樣時盡量均勻加至管中心位置;

4、 當樣品濃度過低時,需先將樣品濃縮到所需體積或所需濃度。

*本試劑僅供實驗室研究使用