?熒光光度計主要原理依據是：激發光照射待測熒光物質發出熒光，經過放大器至記錄儀，記錄儀得出的信號即為樣品溶液的熒光強度。本文主要介紹了RF-5301PC型熒光分光光度計 的工作原理、操作規程以及注意事項等。

儀器設備 編號、名稱儀器設備 名稱：熒光分光光度計型 號：RF-5301PC型國 別 廠 家：日本島津公司

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工作原理熒光產生的原理熒光的定義：某些物質受紫外光或可見光照射激發后能發射出比激發光波長較長的光。熒光產生的原理：化學物質能從外界吸收并儲存nen量(如光能、化學能等)而進入激發態，當其從激發態再回復到基態時，過剩的nen量可以電磁輻射的形式放射(即發光)。熒光化合物的兩種特征光譜1. 熒光激發光譜，就是通過測量熒光體的發光通量隨波長變化而獲得的光譜，它反映了不同波長激發光引起熒光的相對效率

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2. 熒光發射光譜，如使激發光的波長和強度保持不變，而讓熒光物質所產生 的熒光通過發射單色器后照射于檢測qi上，掃描發射單色器并檢測各種波長下相應的熒光強度，然后通過記錄儀記錄熒光強度對發射波長的關系曲線，所得到的譜圖稱為熒光光譜。物質的激發光譜和熒光發射光譜，可以用作該物質的定性分析。當激發光強度、波長、所用溶劑及溫度等條件固定時，物質在一定濃度范圍內，其發射光強度與溶液中該物質的濃度成正比關系，可以用作定量分析。熒光分析法的靈敏度一般較紫外分光光度法或比色法為高，濃度太大的溶液會有“自熄滅”作用，以及由于在液面附近溶液會吸收激發光，使發射光強度下降，導致發射光強度與濃度不成正比，故熒光分析法應在低濃度溶液中進行。熒光發射的特點：可產生熒光的分子 或原子在接受能亮后即刻引起發光;而一旦停止供能，發光(熒光)現象也隨之在瞬間內消失。

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溶液熒光光譜通常具有的特征：(1) 斯托克斯位移：在溶液熒光光譜中，所觀察到的熒光的波長總是大于激發光的波長。(2) 熒光發射光譜的形狀與激發波長無關。(3) 熒光發射光譜的形成與吸收光譜的形狀有鏡像關系