Frdbio® Strep-tag II標簽蛋白純化試劑盒
產品名稱： Frdbio® Strep-tag II標簽蛋白純化試劑盒
英文名稱：
產品編號： PPR0022k
產品價格： null
產品產地： 中國
品牌商標： Frdbio
更新時間： 2023-08-15T17:03:56
使用范圍：
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- 所在區域 : 湖北省
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產品介紹：
Frdbio? Strep-tag II標簽蛋白純化試劑盒用于純化各種表達系統中含有Strep-tagII或者TwinStrep-tagII標簽的重組蛋白，包括大腸桿菌表達系統、哺乳動物表達系統、酵母表達系統等等;本試劑盒配備了純化蛋白所必需預裝柱及核心試劑。
本試劑盒中預裝柱的填料為Streptactin Beads 4FF。偶聯到填料的蛋白配基為改良Streptactin蛋白，主要優勢如下：
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本蛋白純化試劑特點：
???Strep-tagII/TwinStrep-tagII這兩個標簽標小，并且對蛋白結構沒有影響；
???Strep-tagII/TwinStrep-tagII標簽與Streptactin親和力高，非6*His、GST之輩可比；
???Streptactin Beads這個純化可以耐受變性劑，在高濃度尿素和鹽酸胍里仍然可以輕松掛柱，純化包涵體不是障礙；
???生物素可以輕松洗脫，不需要昂貴的脫硫生物素；
???洗脫條件溫和，不會對蛋白造成造成損傷；
???填料再生簡單，反復使用，實驗室測試表明再生15次后，Streptactin Beads填料效率沒有明顯降低。
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產品主要參數：
基質：交聯度4%瓊脂糖凝膠
配體：改良Streptactin蛋白
載量：4mg Twin Strep-tagII蛋白/ml基質
介質微球粒徑：45-165um
最大流速：300cm/h
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試劑盒已經提供材料：
產品編號 | 預裝柱 | 濃縮基礎緩沖液（10X） | 濃縮洗脫緩沖液(10X) | 濃縮再生緩沖液（10X） |
PPR0022k-2*1mL | 1mL*2 | 30ml | 15ml | 15ml |
PPR0022k-5mL | 5mL | 30ml*2 | 30ml | 30ml |
其他需要自備試劑材料：
2??待純化蛋白樣品；
2??移液器及吸頭；
2??去離子水；
2??0.22μm或0.45μm濾膜過濾。
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產品儲存
儲存緩沖液：含20%乙醇的1×PBS
儲存溫度：2-8℃
產品使用操作：
1.使用前準備
1）緩沖液的準備
基礎緩沖液:
按照實驗所用量，取試劑盒中濃縮基礎緩沖液，加入9倍體積的去離子水稀釋成基礎緩沖液；
洗脫液:
按照實驗所需用量，取試劑盒中濃縮洗脫液，加入9倍體積的去離子水稀釋成洗脫液；
再生液:
按照實驗所需用量，取試劑盒中濃縮再生液，加入9倍體積的去離子水稀釋成再生液；
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緩沖液在使用之前建議用0.22μm或0.45μm濾膜過濾。
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2）樣品準備樣品
使用上述基礎緩沖液制備上樣樣品（細胞/細菌裂解液），樣品在上樣前用0.22μm或0.45μm濾膜過濾，防止堵塞柱子。
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3）Frdbio??Streptactin Beads 4FF純化柱的準備
取出試劑盒中預裝柱平衡到室溫，打開純化柱底部開關，用3-5個體積去離子水沖洗柱床，隨后用5-10個柱床體積基礎緩沖液平衡柱子，確保柱床無氣泡。
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2.從樣品中純化目標蛋白
1）使用蠕動泵上樣或者直接上樣（重力法）；
上樣量不要超過柱子的結合能力。
2）上樣完畢后，用基礎緩沖液洗掉未結合的雜蛋白，直到到紫外吸收監測儀達到一個穩定的基線（一般需要10-15個柱體積）；
3）使用洗脫液洗脫目的蛋白，順次接收并做好標記，直到到紫外吸收監測儀達到一個穩定的基線（一般需要5-10個柱體積）；
4）SDS-PAGE檢測分析得到的純化樣品（包括流穿組分、洗雜組分和洗脫組分）以及原始樣品。
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3.純化柱清洗、再生與保存。
1）5-10倍柱床體積的洗脫緩沖液繼續清洗；
2）3倍柱床體積的去離子水清洗；
3）5-10倍柱床體積的0.1M NaOH溶液；
4）3倍柱床體積去離子水清洗后于含20%乙醇的PBS 2-8℃保存。