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DuGreen 核酸染料（10,000× 水溶液）

DuGreen 核酸染料特點

● 無毒性：DuGreen 獨特的油性和大分子量特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內，艾姆斯氏試驗???
結果也表明，該染料的誘變性遠小于EB。
● 靈敏度高：適用于各種大小片段的電泳染色，對核酸遷移的影響小于SYBR Green I。
● 穩定性高：適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠；室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩定，耐光性強。
● 信噪比高：樣品熒光信號強，背景信號低。
● 操作簡單：在預制膠和電泳過程中染料不降解；而電泳后染色過程也只需? 30 分鐘且無需脫色或沖洗 ，即可直接用可見光凝膠透射儀觀察。
● 適用范圍廣：可選擇電泳前染色（膠染法）或電泳后染色（泡染法）；適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳；可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。
● 與標準凝膠成像系統以及可見光激發的凝膠觀察裝置完美兼容：適用于使用254nm 激發的紫外凝膠成像系統或可見光激發的凝膠觀察裝置。

DuGreen 使用方法簡介

1．膠染法（用法同EB）（推薦方法）
（1） 制膠時加入DuGreen 核酸染料。（例如：每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL DuGreen? 10,000× 儲液，以此比例類推）。
（2） 按照常規方法進行電泳。
注意事項：

• 此方法染色染料用量相對較少。500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。
• 由于DuGreen 具有良好的熱穩定性，可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷卻。搖晃，振蕩或者翻轉以保證染料充分混勻。也可以選擇將DuGreen 儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中，然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。DuGreen 兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
• 如果總是看到條帶彌散或分離不理想，建議使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關。如果染色后問題依舊存在，則說明問題與染料無關，請嘗試：降低瓊脂糖濃度；選用更長的凝膠；延長凝膠時間以保證邊緣清晰；改進上樣技巧或選擇泡染法染色。
• 此方法不適合預制聚丙烯酰胺凝膠，對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。

2．泡染法
（1） 按照常規方法進行電泳。
（2） 用H2O將DuGreen 10,000× 儲液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中，制成3× 染色液。（例如將15μL DuGreen 10,000× 儲液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中）。
（3） 將凝膠小心地放入合適的容器中，如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右。
注意事項：

• 用泡染法染色時，染料用量較多。單次使用的染色液可重復使用3次左右。
• 3× DuGreen 染色液可以大量制備，在室溫下避光保存直至用完。

幾種核酸染料比較