RNA穩定保存液-常用生化試劑-試劑-生物在線
北京博奧森生物技術有限公司
RNA穩定保存液

RNA穩定保存液

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產品名稱: RNA穩定保存液

英文名稱: RNAstable

產品編號: C6133

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產品產地: 北京

品牌商標: Bioss

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簡介:
適用于動物組織(心,肝,腎,肌肉,睪丸,腦,脾等)、培養細胞、RNA 病毒、果蠅、細菌、白細胞、全血、一些植物組織等。RNAstable 是一種水相的,無毒的組織保存液體,可以迅速滲入新鮮組織細胞的胞漿中,在非凍狀態下原位穩定和保護細胞內的RNA。取下組織薄片后立刻浸入RNAstable保存并不影響將來提取RNA的質量和數量。RNAstable消除了RNA樣品需要立刻處理或者必須液氮保存的不方便。浸入RNAstable后,新鮮組織細胞中RNA可以完好的在37C下保存一天, 在25C下保存一周, 4C下保存一個月, 在-20C或-80C下長期保存。RNA 病毒樣品(如HCV 和HIV)可在37C保存一個月。
產品優勢:
1. 操作容易:將組織剪成適當大小,浸沒在RNAstable中即可使其RNA不被降解。
2. 無需液氮:使樣品的保存不需液氮,干冰或-80C冰箱, 尤其適用于臨床和野外樣品的快速和大規模采集。
3. 方便運輸:處理過的樣品能在25C保存一周, 使樣品郵寄和運輸變得容易和便宜, 有利學術合作和交流。
4. 多次凍融:經RNAstable處理的樣品可反復凍融多次, 其間可對樣品進行各種處理而不影響最終提取的RNA 的質量。
5. 穩定性強:RNAstable能減少大規模樣品處理中的誤差, 增加各次實驗數間的可比性,對大規?;虮磉_譜的分析尤其有用。
6. 兼容性廣:多種總RNA提取試劑都可以用來提取保存在RNAstable內的樣品。還可直接用于組織切片, 免疫學和流式細胞分析而不影響RNA 提取的質量。
使用說明:
RNAstable只用于新鮮組織,浸泡入RNAstable前請勿冷凍組織!只需迅速將新鮮組織剪成長,寬,高任意一邊厚度<0.5cm大小塊浸入RNAstable即可(RNAstable浸透力強,只需一邊厚度不超過0.5cm即可)。將新鮮組織浸泡在5倍體積的RNAstable中,按指示存放在合適的溫度。
1. 動物組織
RNAstable并不破壞或者溶解組織結構,因此浸泡在RNAstable中達到滲透平衡的組織可以從RNAstable中取出,然后切成更小的塊,然后放回RNAstable中,下次繼續使用。小器官如小鼠肝、腎和脾不需要剪切,可以完整的存放在RNAstable中。
2. 植物組織
很多植物組織直接浸泡到RNAstable即可,某些植物有天然滲透屏障如蠟質保護層,需要先破壞蠟質層,便于RNAstable滲透。
3. 組織培養細胞
細胞被吹打下來后,離心收集細胞,棄上清,用冰浴的PBS緩沖液洗一次,去除殘留培養液。將細胞懸浮在少量PBS緩沖液中,加入5-10倍體積的RNAstable,混勻。 4. 血和血漿
紅細胞和從血清中分離的白細胞可以用組織培養細胞保存方法一樣進行保存。RNAstable也可以保存抗凝全血、血清和血漿。對于全血加入3倍體積的RNAstable,混勻。 5. 酵母
離心收集3x108細胞(>12,000g離心2分鐘),立刻將細胞團重懸在0.5-1ml的RNAstable中。酵母細胞可以保存在RNAstable中25C 8小時,4度一周。如果需要保持更長時間,將酵母細胞放在RNAstable中放置一個小時后,再次>12,000g離心5分鐘,將酵母細胞團放入液氮,瞬時冷凍后置于-80C保存。
6. 細菌
RNAstable不破壞細菌,但是細菌也不能在RNAstable中生長。細菌在RNAstable中保存一個月仍舊可以提出完整的RNA。
RNAstable中樣本保存
1. 存放在-80C
此法可以長期保存樣本。將RNAstable中的樣本放于4C過夜,然后將樣本撈出,盡量去除干凈RNAstable液體,然后放置于-80C。對于組織培養細胞,則不需要去除RNAstable,直接冷凍于-80C,并不會裂解細胞。樣本使用時可以在室溫融化,并且還可以再次冷凍而不影響RNA的完整性和產量。
2. 存放在-20C
將RNAstable中樣本放置于4C過夜,然后轉移到-20C。在-20C樣本不會被冰凍,但是可能會形成一些結晶,這并不會影響將來RNA提取。樣本使用時可以在室溫融化,并且還可以再次冷凍而不影響RNA的完整性和產量。
3. 存放在4C
樣本可以存放在4C一個月。
4. 存放在25C
存放于25C樣本的RNA在一周內保持完整,保存2周的樣品RNA有輕微降解,勉強能用于Northern 分析,但是質量足夠用于Nuclease Protection 分析或者RT-PCR分析。
5. 存放于37C
6. 存放于37C樣本的RNA在24小時內保持完整,3天后有部分降解。
RNAstable中樣本的RNA提取
將樣本從RNAstable中取出,RNAstable可以直接倒入水池,用自來水沖洗即可,不需要特殊處理。
1. 組織
用干凈鑷子將樣本從RNAstable中撈出,用吸水紙吸去殘留的RNAstable后,可以和新鮮組織一樣按照液氮研磨,然后勻漿處理,按后續標準程序進行RNA提取。
2. 細胞
對于保存在RNAstable中的細胞有兩種選擇,一是去除RNAstable后提取RNA,另一個是直接從細?和RNAstable混合物中提取。
(1) 去除RNAstable后提取RNA
存放于RNAstable中的細胞可以承受較高的離心速度(約x5000g)而不破裂,由于每種細胞的強度不同,可以先用不重要的細胞做預實驗,以保證在使用的速度下離心不會破壞細胞。另外,可以在離心前加等體積的PBS稀釋RNAstable和細胞的混合物,以減少溶液密度,使細胞沉淀下來。
(2) 不去除RNAstable,直接提取RNA
可以直接加10倍體積的一步法RNA提取試劑(C06-01029)到細胞和RNAstable混合物中,然后按照標準程序提取RNA。