產品簡介

Celthy PEI轉染試劑轉染試劑是一種化學合成、不含動物源成分、經優化改造后的線性化聚乙烯亞胺（Polyethylenimine Linear, PEI），濃度為1 mg/mL。本產品具有以下特點：

適合轉染DNA，細胞密度在70%~80%時，轉染效率可以達到80%以上；

既適合貼壁細胞，也適合懸浮細胞轉染；

可滿足瞬時轉染和穩定轉染；

轉染細胞形態良好并表達大量的目的蛋白；

產品易溶、操作簡便；

適用于大規模的轉染。

運輸與保存方法

運輸方式：冰袋運輸。保存方式：2-8ºC保存，有效期2年。

注意事項

1）為提高轉染效率，建議懸浮細胞在無血清培養體系中馴化幾天后進行轉染操作。

2）轉染過程中推薦使用高質量的質粒，如不含內毒素的質粒。

3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套及通風櫥操作。

4）本產品僅用于科研用途。

轉染操作流程

一 懸浮細胞（以1 L體系為例）

1 接種細胞

根據細胞狀態，選擇合適的接種密度，建議細胞接種密度為1-1.5×10⁶ cells/mL，使第二天轉染時細胞密度為2-3×10⁶ cells/mL為宜。

2 轉染復合物配置

1）質粒與試劑比例：建議質粒（μg）與試劑（μL）參考配比區間為1:1 - 1:3。

2）質粒稀釋：使用50 mL無血清培養基（Opti-MEM）稀釋2 mg質粒，并輕輕混勻。

3）試劑稀釋：使用48 mL無血清培養基（Opti-MEM）稀釋2 mL Celthy Polyethylenimine Linear (PEI)轉染試劑，并輕輕混勻。

4）配置復合物：將配置好的50 mL試劑稀釋液加入到50 mL質粒稀釋液中，輕輕渦旋混勻后，室溫靜置10-20 min，形成質粒-PEI復合物，備用。

3 轉染細胞

1）直接將100 mL的質粒-PEI復合物加入1 L培養的細胞中。

2）在合適溫度與CO₂等條件下繼續培養細胞，并在培養72 h-96 h或摸索的合適條件下進行病毒收獲。

二 貼壁細胞（以10 cm培養皿為例）

1 接種細胞

根據細胞狀態，選擇合適的接種密度，建議細胞鋪板密度為50-80 %，使第二天轉染時細胞密度70-90 %為宜。

2 轉染復合物配置

1）質粒與試劑比例：建議質粒（μg）與試劑（μL）參考配比區間為1:1至1:3。

2）質粒稀釋：使用250 μL無血清培養基（Opti-MEM）稀釋8 μg質粒，并輕輕混勻。

3）試劑稀釋：使用242 μL無血清培養基（Opti-MEM）稀釋8 μL Celthy Polyethylenimine Linear (PEI)轉染試劑，并輕輕混勻。

4）配置復合物：將配置好的250 μL試劑稀釋液加入到250 μL質粒稀釋液中，輕輕渦旋混勻后，室溫靜置10-20 min，形成質粒-PEI復合物，備用。

3 轉染細胞

1）直接將500 μL的質粒-PEI復合物加入10 mL培養的細胞中。

2）在合適溫度與CO₂等條件下繼續培養細胞，并在培養72 h-96 h或摸索的合適條件下進行病毒收獲。

表1 不同細胞培養容器轉染用量（僅供參考）