酵母雙雜交/酵母單雜交/文庫構建/文庫篩選-分子生物學服務 -技術服務-生物在線
武漢金開瑞生物工程有限公司
酵母雙雜交/酵母單雜交/文庫構建/文庫篩選

酵母雙雜交/酵母單雜交/文庫構建/文庫篩選

商家詢價

產品名稱: 酵母雙雜交/酵母單雜交/文庫構建/文庫篩選

英文名稱: yeast two-hybrid

產品編號: 基因服務07

產品價格: 詢價

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更新時間: null

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武漢金開瑞生物工程有限公司
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酵母單雜交
酵母單雜交技術是在酵母雙雜基礎上發展而來的一種研究核酸-蛋白相互作用的工具,被廣泛用于研究真核細胞內基因的表達調控,如鑒別DNA結合位點發現潛在的結合蛋白基因、分析DNA結合結構域信息等。
酵母雙雜交
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酵母雙雜交系統已發展成為鑒定和檢測蛋白質相互作用的一種標準方法,在蛋白質相互作用關系的研究中扮演著非常重要角色。

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核蛋白酵母雙雜交:
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核蛋白酵母雙雜交技術最初由Fields等人在研究酵母轉錄因子GAL4性質時建立,后續經過不斷改進已發展成為一種成熟的蛋白-蛋白互作研究工具,具有簡便、靈敏、可反映蛋白在活細胞內互作真實情況的特點,被廣泛應用于互作蛋白的篩選、蛋白相互作用的鑒定/驗證、蛋白互作機理的探究、蛋白連鎖圖譜繪制等工作。

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膜蛋白酵母雙雜交:
UALmembrane技術在傳統的酵母雙雜交系統的基礎上,巧妙地利用分離的泛素系統(split-ubiquitin)進行蛋白質相互作用的篩選;泛素作為降解信號分子,人為分成兩部分:N端(Nub),C端(Cub),互補重構的完整泛素分子可被泛素專一性蛋白酶(UBPs)識別,從而導致與泛素相連的蛋白被酶解。

技術應用

酵母雙雜交系統因其具有靈敏性高,功能強大,適應范圍廣等特點,現已被廣泛應用于多個研究領域:
1、將已知基因作為誘餌,在選定的cDNA文庫中篩選與誘餌蛋白相互作用的蛋白;
2、一對已知蛋白相互作用研究;
3、蛋白相互作用結構域和位點的研究;
4、建立基因組蛋白連鎖圖。

服務優勢
采用Clontech SMART專利技術,以總RNA為模板,用SMART方法反轉錄成cDNA,材料用量少,獲得全長的比例高。

服務流程

酵母單/雙雜交文庫構建

接受訂單及樣本→總RNA提取→反轉錄→雙鏈cDNA→酵母感受態細胞→轉化→文庫效價測定→成果交付

酵母單雜交文庫篩選

接收訂單及樣品—誘餌載體及誘餌菌株構建—自激活檢測—克隆數計數—陽性克隆菌株鑒定—結果交付

酵母雙雜交文庫篩選

接受訂單及樣本→構建誘餌載體→毒性檢測→測定雜交效率→鑒定陽性克隆菌株→成果交付

服務內容及說明

酵母單雜交

服務項目

客戶提供

最終交付

文庫構建

組織/細胞

滴度在1×108cfu/mL以上的酵母文庫菌液;文庫PCR鑒定結果圖片(陽性率在80%左右)

文庫篩選

promoter基因序列/質粒

篩選過程中的全部原始圖片;篩選獲得所有相互作用的獵物蛋白的測序結果

?針對酵母單雜交實驗結果,可作進一步驗證:

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服務內容

實驗目的

細分

周期(工作日)

EMSA

驗證啟動子和蛋白互作

探針合成及標記

10

EMSA實驗

20

雙螢光素梅檢測

驗證啟動子和蛋白互作

載體構建

10-15

雙螢光素酶檢測

25

注:1. 雙螢光素酶檢測默認使用293T細胞,使用其他細胞視培養及轉染難度議價;
2. 雙螢光素酶檢測啟動子-轉錄因子驗證默認1個轉錄因子 + 啟動子序列WTMut1個;microRNA靶基因驗證默認1microRNA + 靶序列WTMut1個,超過以上組合數量請詢價。

酵母雙雜交

服務項目

客戶提供

最終交付

文庫構建

組織/細胞

滴度在1×108以上的酵母文庫菌液;文庫PCR鑒定結果圖片(陽性率在90%左右)

文庫篩選

蛋白序列/基因序列/質粒

篩選過程中的全部原始圖片;篩選獲得所有相互作用的獵物蛋白的測序結果

針對酵母雙雜交實驗結果,可作進一步驗證:

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服務內容

實驗目的

細分

周期(工作日)

Co-IP

驗證蛋白互做

/

20

GST pull-down

驗證蛋白互做

GST pull-down+WB/銀染

20? ?

服務鏈接:http://www.genecreate.cn/yeast_two-hybrid/

關于金開瑞:
武漢金開瑞生物工程有限公司是一家專業為全球各大制藥公司、科研診斷試劑公司、各大高校/科研院所以及大型醫院的臨床科室提供生物相關技術服務的一站式供應商。優勢服務項目包括有基因合成、載體構建、蛋白質組學服務、病毒包裝、蛋白表達、抗體制備等。更多詳見http://www.genecreate.cn/

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