<div> <div> <div id="myTabContent"> <div id="a1"> <div id="d1"> <p><span style="font-size: 16px;">細胞介紹</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">在 1986 年診斷時從一名 65 歲患有急性髓性白血病 (AML FAB M4) 的男性的外周血中建立；文獻中描述了表達視黃酸受體基因的細胞；細胞系攜帶 DNMT3A R635W 突變&nbsp; </span></p> <p><span style="font-size: 16px;">細胞特性</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">1）&nbsp;來源：65 歲&nbsp;&nbsp;急性髓性白血病男性的外周血</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">2）&nbsp;形態：懸浮的單個圓形至橢圓形細胞 </span></p> <p><span style="font-size: 16px;">3） 含量：&gt;1x10^6 細胞數</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">4）&nbsp;規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">5)&nbsp;&nbsp;用途：僅供科研使用。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">運輸和保存</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">干冰運輸及復蘇好存活細胞</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">細胞接收后的處理</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">1） 收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。 </span></p> <p><span style="font-size: 16px;">2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10&times;，20&times;）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">3） 懸浮細胞：T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中（加入按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基）。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。&nbsp;&nbsp;收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">一．培養基及培養凍存條件準備</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">1）&nbsp;準備RPMI 1640 (推薦貨號：iCell-0002)基礎培養基，10% 優質胎牛血清，1% P/S</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">2）&nbsp;培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">3）&nbsp;凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。放2-8℃度冰箱冷卻30min左右。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">二．&nbsp;細胞處理</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">1）&nbsp;凍存細胞的復蘇</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">2）&nbsp;細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">懸浮狀態下生長的細胞，可以通過向培養瓶中添加完全培養基來維持細胞的生長狀態，一般情況下細胞密度維持在1&times;105~1&times;106個/mL（不同細胞對密度要求不同，）可以維持細胞的正常生長。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">3）&nbsp;細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">下面T25瓶為例；</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">1.&nbsp;細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1&times;106~1&times;107個活細胞/ml.</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">2.&nbsp;1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1&times;106~1&times;107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">3.&nbsp;將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。</span></p> </div> </div> </div> </div> </div> <div> <div> <div><span style="font-size: 16px;"> 注意事項</span> <div>&nbsp;</div> <div id="cont"> <p><span style="font-size: 16px;">1.收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響，故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。</span></p> <p><span style="font-size: 16px;">4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。</span></p> </div> </div> </div> </div>