動物品種

BALB/c小鼠

動物性別

雄性

動物周齡

6周齡

造模方法

OVA+氫氧化鋁凝膠致敏、OVA滴鼻激發

以每只小鼠20ugOVA加氫氧化鋁凝膠至300uL的劑量（或20ug OVA、75uL CFA加PBS至200uL）配制混合液，振蕩器上振蕩兩分鐘，形成混懸液。小鼠適應性飼養1周后，用注射器分別于小鼠腹部皮下、左右背部皮下各注射100uL新配置的混懸液（每只共300uL），注射時間為第1、8、15天。于第22天開始，氣管滴注給藥使小鼠吸入5% OVA溶液，緩慢給藥，連續激發7天。

成模鑒定

1.  一般觀察 哮喘模型組小鼠在激發開始后出現打噴嚏、點頭呼吸、呼吸急促、哮鳴音、腹肌收縮煩躁等典型哮喘發作癥狀，并且后期觀察中發現飲食減少、毛色無光澤、行動遲緩及體重逐漸下降。

2.  支氣管肺泡灌洗液(BALF)的收集最后1次激發24h后(第28天)將各組小鼠頸椎脫臼處死，無菌條件下分離氣管，結扎左主支氣管后，剪開右主支氣管插入氣管導管并固定，無菌生理鹽水灌洗3次。1mL/次，收集的BALF于4℃，1200R/min離心5min，棄去上清液，PBS重懸細胞沉淀并涂片進行細胞分類，BALF中白細胞總數及EOS（嗜酸性粒細胞）計數。

3.  ELISA檢測血清中（可增加檢測BALF上清液）IgE、OVA特異性IgE、IL-4和IL-5的含量；

4.  組織病理學：取左肺組織用4%多聚甲醛固定、脫水、石蠟包埋，4μm切片，HE染色。正常組支氣管無明顯炎癥細胞浸潤，結構正常。哮喘組可見彌漫性細小支氣管和血管周圍炎性細胞浸潤，其中嗜酸細胞顯著增多。氣道上皮有不同程度脫落，支氣管豁膜上皮杯狀細胞增生，管腔內可見豁液栓及炎性滲出，支氣管平滑肌顯著增厚，血管周圍水腫。

造模周期

35天

后續檢測指標建議

呼吸系統疾病模型中基本都會收集支氣管肺泡灌洗液，進行細胞分類與計數，可以增加檢測BALF上清液中的細胞因子含量

備注