鼠尾I型膠原蛋白
產(chǎn)品名稱(chēng)： 鼠尾I型膠原蛋白
英文名稱(chēng)： Rat tail type I collagen
產(chǎn)品編號(hào)： IMC-A01
產(chǎn)品價(jià)格： 0
產(chǎn)品產(chǎn)地： 廈門(mén)/IMMOCELL
品牌商標(biāo)： IMMOCELL
更新時(shí)間： 2023-08-17T17:21:32
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 : 林經(jīng)理
- 地址 : 廈門(mén)火炬高新區(qū)（翔安）產(chǎn)業(yè)區(qū)翔星路98號(hào)強(qiáng)業(yè)樓306-3室
- 郵編 : 361000
- 所在區(qū)域 : 福建
- 電話(huà) : 180****0267 點(diǎn)擊查看
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- 郵箱 : 2205839769@qq.com
▍產(chǎn)品描述
膠原蛋白是結(jié)締組織和內(nèi)部器官中發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞外基質(zhì)的主要結(jié)構(gòu)成分，但在真皮、肌腱和骨骼中最普遍。它在結(jié)構(gòu)上和基因上被分為許多不同的類(lèi)型。I型膠原是一種異質(zhì)二聚體，由兩條alpha1(I)鏈和一條alpha2(I)鏈組成，在中性pH和37℃下自發(fā)形成三螺旋支架。I型膠原是培養(yǎng)肝細(xì)胞、纖維母細(xì)胞、脊髓神經(jīng)節(jié)、肌肉細(xì)胞、雪旺細(xì)胞、胚胎肺細(xì)胞、上皮細(xì)胞和其他細(xì)胞的優(yōu)良底物。
本公司鼠尾膠原蛋白可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿，培養(yǎng)一些在普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細(xì)胞；也可用于制備三維膠，模擬真實(shí)的生長(zhǎng)環(huán)境，使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長(zhǎng)。
1.在使用逸漠鼠膠原蛋白 I 型包被的細(xì)胞培養(yǎng)皿中觀察到PC-12 細(xì)胞的貼壁和生長(zhǎng)。
2.在 1mg/mL 濃度以上，pH 為7 左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度的三維膠，NIH-3T3 細(xì)胞可在三維膠內(nèi)正常生長(zhǎng)、PC-12 細(xì)胞在三維膠表面正常生長(zhǎng)。
▍產(chǎn)品信息
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 鼠尾I型膠原蛋白 |
| 來(lái)源 | 鼠尾肌腱 |
| 規(guī)格 | 100 mg (凍干法) |
| 純度 | >90%（經(jīng)考馬斯藍(lán)染色SDS-PAGE測(cè)定） |
| 形態(tài) | 溶于 0.02M HAc 溶液 |
| 儲(chǔ)存 | 2~8℃保存，有效期 1 年。不可凍存。避免反復(fù)凍融 |
| 濃度 | 5 mg/ml (不同批次的濃度不同)? |
| 研究領(lǐng)域 | 細(xì)胞生物學(xué) |
| 特別說(shuō)明 | 鼠尾I型膠原蛋白，可作為凝膠或薄層包被使用。請(qǐng)參閱背面的使用程序 |
| 注：本產(chǎn)品僅供研究使用。不得用于診斷或治療程序 | |
▍使用說(shuō)明?
膠原蛋白 I 可凝膠到蓋玻片或組織培養(yǎng)皿上或用作細(xì)胞附著的薄膜涂層。細(xì)胞可在凝膠頂部，凝膠內(nèi)或凝膠層之間培養(yǎng)。?
▍薄層包被（Thin coating）程序
通常包被濃度為 5-10 μg/cm2，推薦濃度可首選 5 μg/cm2。建議根據(jù)具體的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行優(yōu)化。?
1）膠原蛋白 I 用 0.02 M 乙酸稀釋配置 50 μg/ mL 工作液，膠原蛋白 I 不溶于中性 pH 溶液。?
2）以 5 μg/cm2涂布培養(yǎng)皿，例如：一個(gè) 35 mm 的培養(yǎng)皿的表面積約為 10 cm2，1~2 mL 的工作液足以覆蓋此皿。?
3）室溫孵育 1 小時(shí)。?
4）小心吸取剩余溶液，用 PBS 或無(wú)血清培養(yǎng)基洗滌以除去多余乙酸。?
5）組織培養(yǎng)皿包被后可立即使用，也可風(fēng)干，在 2-8℃無(wú)菌條件下可貯存長(zhǎng)達(dá)一周。?
▍膠凝程序?
膠原蛋白 I 按以下步驟使其 pH 達(dá)到堿性時(shí)凝膠?
1）將無(wú)菌5 cm左右的紗布海綿貼在150 mm培養(yǎng)皿的蓋子上來(lái)制備氨蒸氣室。用氫氧化銨使紗布飽和，把蓋子放在150 mm的培養(yǎng)皿上，暫放置一邊。?
2）將膠原蛋白 I 均勻涂布在要包被物的表面上，厚度可以根據(jù)需要改變，膠原蛋白 I（50-100 μL）足以涂覆22 mm的蓋玻片。 對(duì)于直徑100 mm的培養(yǎng)皿，每個(gè)加入約6 mL；對(duì)于60 mm 培養(yǎng)皿添加約2.3 mL，對(duì)于35 mm培養(yǎng)皿添加約1 mL。?
3）將涂有膠原蛋白的蓋玻片或帶有蓋子的培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)移到氨蒸氣室并暴露三分鐘。?
4）在無(wú)菌蒸餾水中（35 mm 培養(yǎng)皿加5 mL，60 mm 培養(yǎng)皿加10 mL 等）浸泡涂布的蓋玻片或培養(yǎng)皿30 min。吸取原蒸餾 水并加0.5-1.0 mL 無(wú)菌蒸餾水，放置在層流罩中過(guò)夜。?
5）吸出蒸餾水，用含血清的平衡鹽緩沖液溶液代替并保存在 2-8°C。
▍備用膠凝程序
1）在冰上放置以下物品：膠原蛋白 I、無(wú)菌 10×PBS、無(wú)菌蒸餾水、無(wú)菌 1M NaOH
2）確定膠原蛋白 I 待使用溶液所需的最終濃度的體積。
3）在冰上放置無(wú)菌管以收存膠原蛋白 I。
4）在無(wú)菌條件下執(zhí)行以下步驟。
4.1 加入 10×PBS（終體積/10）mL
4.2 計(jì)算要使用的膠原蛋白 I 的體積（不要添加到管中直到步驟 4.6 為止）
4.3 向 10×PBS 溶液中加入（要加入的膠原體積×0.023）mL 的無(wú)菌冰冷1M NaOH
4.4 向 4.3 溶液中加入下述體積的無(wú)菌冰冷蒸餾水：
添加蒸餾水體積=V（終）-V（膠原蛋白）-V(10× PBS）-V（1M NaOH）
4.5 混合管中的物質(zhì)并放入冰中。
4.6 加入膠原蛋白 I 并計(jì)算體積，混勻，冰上備用。
5）膠原蛋白 I 溶液可立即使用或在冰上放置 2-3 小時(shí)。
6）使用時(shí)，無(wú)菌條件下將溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)裝置中 37°C 凝膠 30 min。