產品名稱：GsmartI T4 DNA Ligase

貨號：GWC300

濃度：5 Weiss Unit

有效期：24個月

保存條件：-20℃

產品內容：

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產品簡介

GsmartI T4 DNA Ligase催化雙螺旋DNA或RNA的3’端羥基和5’端磷酸基形成磷酸二酯鍵。該酶修復雙鏈DNA、RNA和DNA/RNA雜合體中的單鏈缺口。連接粘性或平末端DN**段，GsmartI T4 DNA Ligase需要ATP作為輔助因子。

應用

• 用于限制性內切酶酶切的DN**段的克?。?/li>
• PCR產物的克?。?/li>
• 連接雙鏈寡核苷酸接頭到DNA上；
• 定點突變；
• 擴增AFLP；
• 連接酶介導的RNA檢測；
• 雙螺旋DNA、RNA或DNA:RNA雜合體的缺口修復；
• 線性化的DNA自連；

活性單位定義：

1個黏性末端連接單位（CEU）：在16℃、30min內50%連接HindⅢ酶切的lambda DNA產物所需要的酶量。

CEU和Weiss Unit 存在下列轉化關系：1 Weiss Unit = 200 CEU

儲存液

20 mM Tris-HCl (pH 7.5),50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA and 50% (v/v) glycerol

2×T4 Quick Buffer

80 mM Tris-HCl, 20 mM MgCl2, 20 mM DTT, 1 mM ATP (pH 7.8 at 25℃).

抑制或失活條件：

• 當NaCl或KCl的濃度大于200mM時強烈抑制GsmartI T4 DNA Ligase的活性。
• 65℃10min或70℃ 5min可以使GsmartI T4 DNA Ligase失活

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DNA與載體連接：

一、粘性末端連接：

1. 反應體系

2. 22℃孵育30min

3. 50ul化轉感受態用5ul連接產物，50ul電轉感受態用1-2ul連接產物

二、平末端連接：

1. 反應體系