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特定 DNA 片段甲基化檢測

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產品名稱: 特定 DNA 片段甲基化檢測

英文名稱: 特定 DNA 片段甲基化檢測

產品編號: HRSNP02

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Sequenom公司甲基化研究平臺適合于特定DNA片段甲基化的研究。在經過全基因組甲基化芯片或啟動子區甲基化芯片初步篩選后,對差異甲基化基因位點的技術驗證和生物學獨立驗證;或者研究者已確立甲基化基因目標,或只對某些特定DNA甲基化的檢測有興趣的情形。
Sequenom公司DNA甲基化采用專業的引物設計軟件,無需進行PCR 產物純化,無需任何熒光標記,是研究幾個到幾百個甲基化位點的理想手段。

檢測原理?:

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?????? Sequenom 公司DNA甲基化分析采用MassARRAY? EpiTYPER流程,該過程結合堿基特異性酶

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(分子切割)MALDI-TOF檢測原理,可實現多重CpG的分析檢測,同時具有DNA甲基化定量分析

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能力。

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試驗步驟:

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1. 將待測DNA經過亞硫酸鹽處理,DNA中未甲基化胞嘧啶(C)轉變為尿嘧啶(U),而甲基化修飾的胞

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??? 嘧啶不變;

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2. 通過PCR擴增過程引入T7-啟動子序列,經T7 DNA聚合酶的體外轉錄過程得到各樣本RNA產物;

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3. 經過堿基特異性酶切處理,得到RNA小片段,并用飛行質譜檢測每個片段的分子量,最后

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??? EpiTYPER程序完成數據的自動化處理并報告每個檢測片段的甲基化程度。

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技術優勢:

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  • 高靈敏度:可發現低至5%甲基化修飾,樣本起始量低至10 ng。
  • 重復性好CV≤5%。
  • 高性價比:用384孔板進行 PCR 反應,一個擴增產物可以進行多重 CpG位點分析,數據無需后續驗證,可直接發表結果。

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參考文獻:

  1. Wang, L., et al., Relation between hypomethylation of long interspersed nucleotide elements and risk of neural tube defects. American Journal of Clinical Nutrition, 2010, 91:1359-1367.
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