原核蛋白表達與純化
產品名稱： 原核蛋白表達與純化
英文名稱： Prokaryotic expression and purification of protein
產品編號： GM-PP-02
產品價格： 0
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品牌商標： null
更新時間： null
使用范圍： null
- 聯系人 : 吳經理
- 地址 : 上海市浦東新區康威路299號東區1幢5層
- 郵編 :
- 所在區域 : 上海
- 電話 : 131****9830 點擊查看
- 傳真 : 點擊查看
- 郵箱 : c.wu@genomeditech.com
該服務根據客戶構建好的表達載體，并參考客戶提供的實驗方案，如溫度、IPTG誘導濃度及表達時間，選擇合適的E.coli菌株進行目的蛋白誘導表達并純化。如果客戶還沒有構建好表達載體，我們也可以幫您將目的基因插入到特定的表達載體中，并摸索蛋白表達的最優條件。各項服務需額外加付少許費用。表達出的目的蛋白進行SDS-PAGE電泳和Western blot分析。
具體內容
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服務步驟 |
具體內容 |
交付內容 |
交付時間 |
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目標基因亞克?。蛇x） |
1.?擴增并抽提含有目的基因的載體質粒。 2.?將目的基因亞克隆到合適的表達質粒上。 3.?測序驗證構建質粒的準確性。 |
正確構建的重組表達質粒，含重組質粒的DH5α菌株及測序報告。 |
2-3周 |
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E. coli?表達菌株轉化及篩選 |
1.?擴增并抽提構建好的表達質粒。 2.?將表達質粒轉化到高效的E. coli表達菌株中。 3.?至少挑選3個陽性克隆于LB培養基中擴增并選擇合適的條件，SDS-PAGE?檢測蛋白表達情況，篩選出合適菌株。 ? |
重組質粒的表達菌株及表達檢測報告 |
2-3周 |
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目的蛋白的誘導表達及純化 |
1.?對蛋白表達時間，溫度以及IPTG濃度等表達條件進行優化，并誘導表達目的蛋白。 2.?搖瓶培養1L重組細菌，通過親和層析，離子交換，疏水及凝膠過濾等方法純化表達的重組蛋白。? 4.?通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。 5. .通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。 |
≥1mg純化好的目的蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灮蛉コ兓瘶撕灥哪康牡鞍?，純度最高可達95%以上。 |
2-3周 |
服務說明
1. 如果客戶自己已經有構建好的表達載體，須提供我們≥1ug的抽提質粒，而且該表達載體須已做過轉化和表達，證明有目的蛋白表達。或直接提供我們有目的蛋白表達的新鮮或保存菌株。
2. 如果客戶需要我們幫助構建表達載體，須提供我們含有目的基因片段的PCR產物或者已經連接到（TA）或其它克隆載體上的質粒（≥1ug）或菌液。
3. 表中的交付時間是我們的標準服務時間，如果客戶還需蛋白復性等后續服務，服務時間需適當延長，但我們會盡最大努力以最快的速度完成我們的服務。