人基質(zhì)金屬蛋白酶5ELISA北京檢測/人MMP-5 ELISA血清代測-試劑盒-抗體-生物在線

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人基質(zhì)金屬蛋白酶5ELISA北京檢測/人MMP-5 ELISA血清代測

人基質(zhì)金屬蛋白酶5ELISA北京檢測/人MMP-5 ELISA血清代測

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產(chǎn)品名稱: 人基質(zhì)金屬蛋白酶5ELISA北京檢測/人MMP-5 ELISA血清代測

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產(chǎn)品編號: ELISA實驗代測

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產(chǎn)品產(chǎn)地: 加拿大/中國

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人基質(zhì)金屬蛋白酶5ELISA北京檢測/人MMP-5 ELISA血清代測

用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:?

  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。?

  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。?

  3. 加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。?

  4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。?

  5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。?

  6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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Elisa相關(guān)小常識:?
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酶與底物 ? 酶結(jié)合物是酶與抗體或抗原, 半抗原在交聯(lián)劑作用下聯(lián)結(jié)的產(chǎn)物。是ELISA成敗的關(guān)鍵試劑,它不僅具有抗體抗原特異的免疫反應(yīng),還具有酶促反應(yīng),顯示出生物放大作用,但不同的酶選用不同的底物。
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