單B細胞抗體制備
產品名稱: 單B細胞抗體制備
英文名稱: Single B Cell antibody discovery technology
產品編號: 05
產品價格: 面議
產品產地: 上海
品牌商標: 美迪西
更新時間: 2023-09-25T13:48:16
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上海美迪西生物醫藥股份有限公司
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美迪西提供單B細胞抗體制備技術服務,包括單B細胞分選和單B細胞Ig基因轉錄,擴增,測序等。單B細胞抗體制備技術是目前新型、高效的抗體發現方法之一,具有速度快、通量高、以及抗體重輕鏈可變區天然配對的優勢。
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單B細胞分選
根據研究應用,可以隨機或抗原選擇性地從外周血或淋巴組織(如骨髓、脾臟)中分離單B細胞。對于B細胞分離,目前單B細胞分選方式有流式細胞分選法、 磁珠細胞分選法、 顯微操作法、 激光顯微切割法以及微流控分選法。 其中流式細胞熒光分選技術 (Fluorescence activated Cell Sorting,FACS)是目前一種成熟、 有效的單細胞分選方法。
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單B細胞Ig基因轉錄,擴增,測序
從單個B細胞中構建互補DNA (cDNA)為同時分析表達的IgH和IgL鏈基因提供了一種正確的方法。通常,單B細胞cDNA合成是在用于細胞沉積和細胞裂解的設備中進行的(例如96孔板、納米孔芯片等),這確保了方便處理大量樣品并將交叉污染的風險降至最低。全長Ig可變區基因轉錄物通過巢氏PCR進行擴增,其中RT-PCR產物可作為第一輪PCR的樣品進行進一步反應。
無論使用何種Ig可變區基因擴增策略,編碼抗體特異性的單B細胞Ig可變區基因轉錄信息隨后通過測序得到。然后利用各種數據庫,如NCBI的IgBLAST、IMGT,可以很容易地識別和分析重排的V、D和J基因片段是否存在突變、插入和缺失。
