賀融義生(北京)科技有限公司
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TA克隆
?? ? ? ?在使用PCR擴增目的基因片段的過程中,由于不清楚目的基因序列,并不能確定是否獲得單一的PCR產物,要獲得的目的片段,通常需要采用TA克隆的方法。PCR反應使用的聚合酶具有末端轉移的活性,通常在3′端加上polyA,把PCR片段與一個具有3’-T的載體DNA連接轉化,便可獲得單克隆,通過測序得到DNA序列。
技術路線:

研究內容:
測序峰圖
技術參數:
1、樣本要求:
(1) PCR產物已純化
|
片段長度(bp) |
平均濃度(ng/μL) |
樣品量(μL) |
|
100~1500 |
15 |
≥15 |
|
1500~3000 |
25 |
≥15 |
(2) PCR產物未純化
|
片段長度(bp) |
平均濃度(ng/μL) |
樣品量(μL) |
|
100~1500 |
30 |
≥30 |
|
1500~3000 |
50 |
≥30 |
?
2、項目執行周期:
標準的項目執行周期約為5個工作日
3、完成指標及提交結果:
?????? (1)完成指標:測序數據質量達到Q20;
???????(2)提交結果:最終提交測序峰圖、初步分析及結題報告。
