Annexin V-mFluor 570藍色標記
產品名稱： Annexin V-mFluor 570藍色標記
英文名稱： Annexin V-mFluor Blue 510 conjugate
產品編號： 20085
產品價格： 電詢
產品產地： 美國
品牌商標： AAT Bioquest
更新時間： 2026-06-05T13:08:56
使用范圍： null
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產品介紹
膜聯蛋白是一類鈣離子依賴性磷脂膜結合蛋白家族。作為細胞凋亡研究的重要工具，膜聯蛋白V能夠特異性檢測細胞表面暴露的磷脂酰絲氨酸（PS）——這一特征不僅存在于細胞凋亡過程，也可見于其他形式的細胞死亡。
細胞活性檢測可通過多種參數實現，其中膜聯蛋白V-熒光染料偶聯物通過監測磷脂酰絲氨酸（PS）外翻現象，被廣泛應用于細胞凋亡研究。在凋亡過程中，PS會從細胞膜內側翻轉至外側，這種細胞表面PS的出現是凋亡早期/中期的普遍標志，其可檢測性甚至早于細胞形態學變化的發生。
Annexin V-mFluor Blue 570可被488 nm藍激光有效激發，并在~570 nm波長處發射強橙色熒光，其熒光發射強度顯著優于488 nm激發條件下的膜聯蛋白V-Cy3偶聯物。
實驗方案
操作步驟摘要
1.制備含測試化合物的細胞樣本（200 µL/樣本）
2.加入膜聯蛋白V偶聯物檢測溶液
3.室溫避光孵育30-60分鐘
4.使用流式細胞儀或熒光顯微鏡進行分析
儲存與處理條件
熒光標記膜聯蛋白V偶聯物儲存于含0.1%牛血清白蛋白(BSA)的PBS緩沖液(pH 7.4)中。為保持穩定性，建議-20℃避光保存，避免反復凍融（可能影響蛋白完整性）。在推薦條件下可穩定保存至少6個月。
標準實驗方案
膜聯蛋白V偶聯物細胞孵育步驟
1.配制膜聯蛋白V結合緩沖液：10 mM HEPES，140 mM NaCl，2.5 mM CaCl?，pH 7.4
2.用測試化合物處理細胞誘導凋亡（如：Jurkat細胞用星形孢菌素處理4-6小時）
3.離心收集細胞（1-5×10?細胞/管）
4.用200 μL膜聯蛋白V結合緩沖液重懸細胞
5.加入2 μL膜聯蛋白V偶聯物
（可選）加入死細胞染料如碘化丙啶（貨號17585）標記壞死細胞
6.室溫避光孵育30-60分鐘
7.在用流式細胞儀或熒光顯微鏡分析細胞之前，加入300μLAnnexin V綴合測定緩沖液（來自步驟1）以增加體積
8.使用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測熒光強度
流式細胞儀檢測
使用匹配濾光片的流式細胞儀定量膜聯蛋白V結合情況
注：貼壁細胞因收獲過程可能損傷膜結構，常規不建議用于流式檢測。但Casiola-Rosen等已建立相關實驗方法。
熒光顯微鏡檢測
1.從步驟6中吸取細胞懸液，使用膜聯蛋白V結合緩沖液（步驟1）洗滌1-2次，隨后用相同緩沖液重懸細胞。
2.將細胞懸液滴加至已覆蓋蓋玻片的載玻片上。
注：對于貼壁細胞，建議直接在蓋玻片上進行培養。
3.完成膜聯蛋白V偶聯物孵育（步驟6）后，用膜聯蛋白V結合緩沖液（步驟1）洗滌1-2次，并重新加入該緩沖液至蓋玻片。
4.倒置載玻片觀察細胞。也可在膜聯蛋白V偶聯物孵育后，使用2%甲醛固定細胞，并通過配備相應濾光片組的顯微鏡進行觀察。
西安百螢生物科技有限公司是AAT Bioquest 的中國區域總代理。西安百螢× AAT Bioquest —— 讓熒光實驗更簡單，讓檢測信號更明亮！
注：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！