產品介紹

Cell Meter 磷脂酰絲氨酸凋亡檢測試劑盒是一套用于監測細胞活力的專業工具。細胞活力可通過多種參數進行評估，本試劑盒通過檢測磷脂酰絲氨酸（PS）外翻現象特異性監測細胞凋亡過程。在凋亡發生時，PS會從細胞膜內側轉移至外側，其細胞表面暴露可作為凋亡早期/中期的普適性標志物，且該檢測信號早于細胞形態學變化出現。

Cell Meter 磷脂酰絲氨酸凋亡檢測試劑盒采用小分子熒光探針Apopxin™ PS探針，其與PS的結合親和力（Kd < 10 nM）顯著高于膜聯蛋白V。該探針與膜PS結合后呈現深紅色熒光，兼具微孔板、熒光顯微鏡和流式細胞儀多平臺兼容優勢（常規凋亡檢測試劑通常僅適用于單一平臺）

樣品實驗方案

摘要

1.制備含測試化合物的細胞樣本（96孔板：100 µL/孔；384孔板：25 µL/孔）

2.加入等體積的Apopxin™Deep Red工作溶液

3.在室溫下孵育1小時

4.使用熒光酶標儀（底部讀數模式，Ex/Em = 650/680 nm，截止波長665 nm）或配備 Cy5濾片的熒光顯微鏡檢測熒光強度

工作液配制

取10 μL 100X Apopxin™Deep  Red（組分A）加入1 mL檢測緩沖液（組分B），混勻配制成工作液

注：每孔需100 μL工作液，現配現用

實驗操作流程

1.96孔板每孔加入10 µL 或者384孔板每孔加入2.5 µL 10x測試化合物母液（溶于PBS或指定緩沖液），空白對照孔（無細胞培養基）加入等量緩沖液

2.將細胞板置于5% CO?、37℃培養箱孵育（如：Jurkat細胞用星形孢菌素處理4-6小時）

*注：喜樹堿等化合物在405 nm激發時可能因380-490 nm寬發射光譜導致假陽性*

3.在每個孔中添加100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的Apopxin™Deep Red工作溶液。

4.室溫避光下孵育細胞板≥1小時。

5.（特別針對懸浮細胞）800 rpm離心2分鐘（關閉剎車功能）

6.使用熒光酶標儀（底部讀數模式，Ex/Em = 650/680 nm，截止波長665 nm）或配備 Cy5濾片的熒光顯微鏡檢測熒光強度

注：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！