產品介紹

Cell Navigator®熒光成像試劑盒是一套用于標記細胞膜、溶酶體、線粒體和細胞核等亞細胞器的熒光成像工具。該試劑盒通過活細胞器的選擇性標記，為研究細胞事件提供了一種強有力的方法。本款特異性線粒體橙色熒光標記試劑盒采用專利染料，該疏水性化合物通過線粒體膜電位梯度選擇性積聚于活細胞線粒體中，其特有的細胞滯留基團可長期維持線粒體內熒光信號，顯著提升染色效率。該標記方案操作簡便、耗時短，可適配微孔板檢測、免疫細胞化學及流式細胞術等多種平臺，適用于細胞粘附、趨化運動、多藥耐藥、細胞活力、凋亡及毒性檢測等研究。試劑盒提供所有必需組分及優化標記方案，兼容增殖與非增殖細胞、懸浮與貼壁細胞等多種細胞類型。

注意事項

該產品可以在染色后，進行固定，再觀察

實驗步驟概述

1.細胞準備

2.加入MitoLite™ orange工作液

3.37°C孵育30分鐘至2小時

4.使用熒光顯微鏡觀察（激發/發射波長：540/590 nm，TRITC濾光片組）

注意：在開始實驗之前，在室溫下解凍所有組分

工作液配制方法

取20 µL 500× MitoLite™ orange（組分A）加入10 mL活細胞染色緩沖液（組分B）中混勻，避光保存備用

注意：1.20 µL 500× MitoLite™ orange 可滿足1塊96孔板的染色需求

          2.工作液需現配現用，避免光照

合適的工作濃度需根據具體應用調整；染色條件應依據細胞/組織類型及探針滲透性優化

貼壁細胞染色方案：

1.使用96孔黑色壁/透明底培養板（每孔100 µL）或在裝有適當培養基的培養皿中的蓋玻片上培養細胞

2.當細胞達到所需融合度時，加入等體積的MitoLite™ orange工作液

3.講細胞在37°C、5% CO2培養箱中孵育30分鐘至2小時

4.將Mitolite™ orange工作溶液替換為20 mM Hepes的Hanks緩沖液（HH緩沖液）或您選擇的緩沖液（例如，生長培養基按1:1濃度配制的緩沖液）。

5.使用配備TRITC 濾光片組（激發/發射=540/590 nm）的熒光顯微鏡觀察細胞，

注意：若細胞染色不足，建議增加標記濃度或延長孵育時間以使染料積累

懸浮細胞染色方案：

1.以1000 rpm離心細胞5分鐘獲得細胞沉淀，吸除上清液

2.將細胞沉淀輕柔重懸于預熱（37°C）的生長培養基中，加入等體積的MitoLite™ orange工作液

3.在37°C、5% CO2培養箱中孵育30分鐘至2小時

4.將Mitolite™ orange工作溶液替換為HH緩沖液或自選緩沖液

5.使用TRITC 濾光片組觀察細胞

注意：1. 染色不足處理同貼壁細胞方案

          2.懸浮細胞可用經BD Cell-Tak®（BD Biosciences）處理的蓋玻片固定后，按貼壁細胞方案染色

（注：本方案中所有操作步驟均需在避光條件下進行）