珀金埃爾默企業管理(上海)有限公司
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BRET2是一種接近性檢測,以供體蛋白——海腎熒光素酶(Rluc)和受體蛋白——綠色熒光蛋白的突變體(GFP2)之間能量轉移的檢測為基礎。在可滲透性底物DeepBlueC(DBC)存在時,Rluc將其氧化成coelenteramide,同時發出藍色熒光,最大發射波長為395 nm。當受體蛋白接近時,藍色熒光的能量被共振能量轉移到GFP2上,發出綠色熒光,最大發射波長為510 nm。Rluc/DBC和GFP2之間的能量轉移效率通過供體發射光強度除以受體發射光強度的比值來衡量,這個比值就是BRET2信號,反應了Rluc和GFP2的接近程度。
在實際應用中,Rluc和GFP2分別與目標蛋白形成融合蛋白,檢測生物分子的相互作用,相互作用的強弱通過BRET2信號來衡量。
應用范圍:蛋白相互作用,生物感應器,蛋白酶活性檢測。
