細(xì)菌總蛋白提取試劑盒（2D電泳用）
產(chǎn)品名稱： 細(xì)菌總蛋白提取試劑盒（2D電泳用）
英文名稱： none
產(chǎn)品編號(hào)： P1271-25
產(chǎn)品價(jià)格： 0
產(chǎn)品產(chǎn)地： 中國
品牌商標(biāo)： Applygen
更新時(shí)間： null
使用范圍： null
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? ? ? ? ? ? ??細(xì)菌蛋白提取試劑 Ⅱ（變性）????? P1271
描述：細(xì)菌蛋白提取試劑Ⅱ(變性)采用離子型去污劑，用于提取細(xì)菌中總蛋白，適用于后續(xù)的Western Blot等免疫實(shí)驗(yàn)。
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適用范圍：從新鮮或者凍存的細(xì)菌中提取蛋白。
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規(guī)格：25ml?? 100ml?
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儲(chǔ)存：室溫保存?? 12個(gè)月有效
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提取方法：
1.??????
將細(xì)菌培養(yǎng)物在預(yù)先稱重的離心管中4 oC，5000g 離心15分鐘，收集菌體；
2.??????
去上清，稱量菌體重量，按照每克菌體加入10-50ml細(xì)菌蛋白抽提試劑Ⅱ（變性），渦旋震蕩使菌體完全重懸；
3.??????
室溫孵育15-20分鐘（孵育時(shí)間可根據(jù)細(xì)胞類型的不同做調(diào)整）。
4.??????
15000g，離心10分鐘；
5.??????
將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中，即得到總蛋白，可應(yīng)用BCA法進(jìn)行蛋白定量及后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
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注意：
1.??????
該提取試劑中不含有蛋白酶抑制劑，用戶可根據(jù)具體情況添加蛋白酶抑制劑、還原劑、螯合劑等。
2.??????
當(dāng)提取物粘度較高或提取的蛋白以包涵體形式存在時(shí)，建議在加入溶菌酶和DNaseⅠ.
3.??????
如果在提取純化過表達(dá)蛋白的過程中，得到的部分蛋白可能在沉淀中，那么目的蛋白可能以包涵體的形式存在，可使用包涵體蛋白溶解液進(jìn)行溶液，也可以優(yōu)化蛋白表達(dá)條件，增加可溶性蛋白的表達(dá)。
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