TUNEL細胞凋亡原位檢測試劑盒AP顯色系統
產品名稱: TUNEL細胞凋亡原位檢測試劑盒AP顯色系統
英文名稱: no
產品編號: TUNEL-A2
產品價格: 0
產品產地: 北京
品牌商標: 鼎國
更新時間: null
使用范圍: null
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TUNEL細胞凋亡原位檢測試劑盒
(AP檢測系統)
一、???????????? 概述
TUNEL技術是分子生物學與形態學相結合的研究方法,對完整的單個凋亡細胞核或凋亡小體進行原位染色,能準確的反映細胞凋亡最典型的生物化學和形態特征,其靈敏度遠比一般的組織化學和生物化學測定法要高,因而在細胞凋亡的研究中已被廣泛采用。本試劑盒適用于組織樣本(石蠟或冰凍切片)和細胞樣本(細胞爬片)的凋亡原位檢測。
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產品名稱 |
顯色系統 |
產品編號 |
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TUNEL細胞凋亡原位檢測試劑盒 |
AP顯色系統 |
TUNEL-A2 |
二、試劑盒組成
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組分 |
25 assays |
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蛋白酶K溶液 |
1ml |
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阻斷劑 |
1ml |
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標記溶液 |
450μl |
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脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT) |
50μl |
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封閉液 |
1ml |
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AP-SP |
1ml |
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20XSSC |
10ml |
三、自備試劑及用品
a)???????? 淋洗緩沖液(鼎國生物:PBS磷酸鹽緩沖液系列BF-0011/0012/0013/0014)
b)??????? 復染劑(鼎國生物:AR-0711/0712/0721/0722/0771/0772)
c)???????? 封片劑(鼎國生物:AR-0811)
d)??????? 孵育盒(鼎國生物:AR-0951/0952)
e)???????? 定時器(鼎國生物:AR-0961/0962)
f)???????? 顯微鏡
g)??????? BCIP/NBT顯色劑(鼎國生物:AR-0631/0632/0633)
h)??????? 核固紅(鼎國生物:AR-0771/0772)
四、不同類型標本的處理方法:
實驗用玻片:清洗干凈,用多聚賴氨酸或APES進行防脫處理。
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細胞爬片 |
固定液:4% 多聚甲醛(pH7.4 PBS溶液配制)室溫固定30min。 滲透液:0.1% Triton X-100(溶于1XSSC溶液)冰浴2-10min。 |
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石蠟組織切片 |
二甲苯和梯度乙醇100%、95%、75%、50%,常規脫蠟入水。 10~20ug/ml蛋白 酶K |
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冰凍組織切片 |
固定液:4% 多聚甲醛(pH7.4 PBS溶液配制)室溫固定30min。 滲透液:0.1% Triton X-100(溶于1XSSC溶液)冰浴2-10min。 |
五、標本處理后的操作
1.?
2.?
3.? 制備TUNEL反應混合液:處理組用TdT酶和標記溶液體積比1:9混合;陰性對照不加酶,以去離子水代替。
4.? 除去PBS液,加TUNEL反應混合液于標本上,暗盒中
5.? 浸入2XSSC15min終止反應。
6.?
7.? 滴加AP-SP,
8.?
9.? BCIP/NBT 染色后,自來水沖洗,核固紅復染。
10. 復染后,蒸餾水洗,脫水,透明,封片。
結果觀察:顯微鏡下觀察細胞核有藍紫色或藍黑色顆粒者為陽性。
六、保存和有效期:
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為了您的安全和健康,請穿戴實驗服和手套操作!
