XL2-Blue感受態細胞

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1.產品簡介：

本產品是采用大腸桿菌XL2-Blue菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞，適用于大質粒DNA和重組產物的轉化，降低片段大小的偏愛性，多用于文庫構建。

基因型：TetRΔ(mcrA)183 Hte[F′{proAB lacIq lacZM15Tn10(TetR)AmyCamR}](mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44thi-1 recA1 gyrA96 relA1

特點：1．XL2-Blue菌株來源于XL1-Blue菌株，為HTE基因型。Hte使得XL2-Blue適用于大質粒DNA和重組產物的轉化，降低片段大小的偏愛性，多用于文庫構建，已成功應用于40kd質粒的構建。2．recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩定和高純度質粒DNA的提取。3．hsdSMR突變導致EcoK核酸內切酶系統缺失，增強了外源DNA的穩定性和提取質量。4．lacZΔM15 的存在使XL2-Blue菌株可用于藍、白斑篩選。此菌株具有四環素和氯霉素抗性。pUC19質粒檢測，轉化效率可達108 cfu/μg DNA。

2.使用說明：

1．取100 μl感受態細胞置于冰浴中融化。

2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30min。
3．42℃熱擊45sec，然后快速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3min，該過程不要搖動離心管。
4．每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150 rpm振蕩培養45～60min使菌體復蘇。
5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12~16h。

3.注意事項：

1．剛化凍的細胞轉化效率最高，避免反復化凍。

2．整個動作要輕柔。

*本試劑僅供實驗室研究使用