XL2-Blue感受態(tài)細胞
產(chǎn)品名稱： XL2-Blue感受態(tài)細胞
英文名稱： XL2-Blue
產(chǎn)品編號： MCC0210
產(chǎn)品價格： null
產(chǎn)品產(chǎn)地： 中國
品牌商標： Frdbio
更新時間： 2023-09-14T15:02:07
使用范圍： 僅供科研使用
- 聯(lián)系人 : 趙經(jīng)理
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- 所在區(qū)域 : 湖北省
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XL2-Blue感受態(tài)細胞
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
MCC0210 | XL2-Blue感受態(tài)細胞 | 100μl*10 |
保存條件：-80℃。
1.產(chǎn)品簡介：
本產(chǎn)品是采用大腸桿菌XL2-Blue菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞，適用于大質(zhì)粒DNA和重組產(chǎn)物的轉化，降低片段大小的偏愛性，多用于文庫構建。
基因型：TetRΔ(mcrA)183 Hte[F′{proAB lacIq lacZM15Tn10(TetR)AmyCamR}](mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44thi-1 recA1 gyrA96 relA1
特點：1．XL2-Blue菌株來源于XL1-Blue菌株，為HTE基因型。Hte使得XL2-Blue適用于大質(zhì)粒DNA和重組產(chǎn)物的轉化，降低片段大小的偏愛性，多用于文庫構建，已成功應用于40kd質(zhì)粒的構建。2．recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。3．hsdSMR突變導致EcoK核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失，增強了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。4．lacZΔM15 的存在使XL2-Blue菌株可用于藍、白斑篩選。此菌株具有四環(huán)素和氯霉素抗性。pUC19質(zhì)粒檢測，轉化效率可達108 cfu/μg DNA。
2.使用說明：
1．取100 μl感受態(tài)細胞置于冰浴中融化。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30min。
3．42℃熱擊45sec，然后快速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3min，該過程不要搖動離心管。
4．每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150 rpm振蕩培養(yǎng)45～60min使菌體復蘇。
5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12~16h。
3.注意事項：
1．剛化凍的細胞轉化效率最高，避免反復化凍。
2．整個動作要輕柔。
*本試劑僅供實驗室研究使用