熒光定量PCR 相對定量Taqman探針法
產(chǎn)品名稱: 熒光定量PCR 相對定量Taqman探針法
英文名稱: Realyime PCR
產(chǎn)品編號: RT02
產(chǎn)品價格: 0
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品牌商標: null
更新時間: null
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相對定量 (mRNA表達量分析)
基因表達的研究一般采用相對定量的方法。相對定量法必須對樣品的目的基因和內(nèi)參基因同時分別進行定量,然后求出對于內(nèi)參基因的目的基因的相對量。通過對樣品間的目的基因的相對量進行比較,可以對不同樣品間的mRNA進行表達量分析。內(nèi)參基因通常選用表達量相對恒定的Housekeeping Gene,如:GAPDH、β-actin等。通過同時對內(nèi)參基因的實時檢測,可以對樣品之間由于起始細胞數(shù)不同、或RNA提取效率的不同等造成的RNA量誤差進行校正,達到在嚴格意義上對樣品之間的mRNA表達量進行分析之目的。
PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團不斷積累,因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關系,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。
PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團不斷積累,因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關系,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。
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服務內(nèi)容
以熒光定量PCR方法對樣本基因表達進行相對定量。
服務優(yōu)勢
·先進的儀器,優(yōu)質(zhì)的試劑,專業(yè)的團隊,實驗結果更可靠。
·免費設計優(yōu)化引物,使定量PCR反應擴增效率達到90%以上,使相對定量結果更可靠。
終產(chǎn)品
·目的基因剩余引物 (上游引物和下游引物,合成量≥2OD);
·目的基因引物序列;
·相對定量實驗報告;
·剩余探針。
服務說明
·客戶提供基因序列。
·以上報價是以提取的核酸(DNA或cDNA)為起始材料設定的,如果需要進行核酸純化,費用另計。
·如因?qū)嶒灢牧系确潜竟驹蛟斐赡硨嶒灢襟E失敗,使實驗提前終止,已啟動的實驗項目仍正常收費。
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