人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3（TRAIL-R3）ELISA 試劑盒
英文名稱:Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA kit
保存:2-8℃，避光保存
規格:96T/48T
有效期:6個月
人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3（TRAIL-R3）ELISA 試劑盒
操作流程
1. 加入10 μL 校準品、質控品、待測樣品到反應板孔內；
2. 加入100 μL酶標抗體工作液到反應板孔內；
3. 室溫搖床溫育120 min；
4. 洗板6次；
5. 加入1X底物工作液100 μL；
6. 室溫溫育15 min；
7. 加入100 μL終止液，搖勻約5 s；
8. 用波長325 nm/420 nm的激發/發射光檢測
人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3（TRAIL-R3）ELISA 試劑盒

ELISA 試驗時，注意事項如下：
1.　正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2.　在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:
（1）固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。
???? 其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：
???? 用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否良好。
（2）包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。
?? 吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質包被的最適濃度需進行滴定：
?? 即用不同的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后,在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。
?? 選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1～10μg／ml。
（3）　酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。
??? 然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）
??? 在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
（4）　酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。
?? 有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，
??? 應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入