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無細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)是一種以外源mRNA或DNA為模板，在細(xì)胞抽提物或蛋白表達(dá)所必須的酶和輔因子重構(gòu)體系中利用氨基酸和能量合成蛋白質(zhì)的體外反應(yīng)系統(tǒng)。本試劑盒能夠通過質(zhì)粒或線性模板，實(shí)現(xiàn)目的蛋白質(zhì)的快速、高效表達(dá)，試劑盒采用高效的轉(zhuǎn)錄和翻譯偶聯(lián)的方法，通過一步反應(yīng)表達(dá)目的蛋白。該試劑盒提供的表達(dá)系統(tǒng)主要包含：A液和B液。A液：優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液體系及優(yōu)化濃度比例的氨基酸，通過ATP再生系統(tǒng)持續(xù)為蛋白質(zhì)合成提供能量及供給合成蛋白質(zhì)所需的基本原料。B液：優(yōu)化的大腸桿菌提取物，增加了DNA轉(zhuǎn)錄和翻譯過程中結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，增加可溶性蛋白的產(chǎn)量。本試劑盒額外附贈(zèng)PC質(zhì)粒，方便您能直觀地觀測試劑盒性能，也可采用其他以T7為啟動(dòng)子且不含lac操縱子的質(zhì)粒形式，如pet14b。

無細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)試劑盒（增強(qiáng)型）適用于絕大多數(shù)蛋白包括膜蛋白和全長抗體的表達(dá)。

另外，我司還提供適合其他應(yīng)用場景的無細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)試劑盒：

基礎(chǔ)型（Cat#36850ES）適用于大多數(shù)蛋白包括抗體和酶的表達(dá)；

高通量版（Cat#36852ES）適用于蛋白、酶、抗體的高通量篩選；

全長抗體版（Cat#36853ES）適用于全長lgG抗體、Fab抗體和抗體高通量篩選。

【無細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)試劑盒實(shí)驗(yàn)操作演示視頻】

1.大腸桿菌來源：遺傳背景清晰，蛋白質(zhì)產(chǎn)量高。

2.表達(dá)快速：一步反應(yīng)，最快只需要1小時(shí)即可表達(dá)目的蛋白。

3.模板靈活：支持線性模板、質(zhì)粒模板以及PCR產(chǎn)物。

4.蛋白產(chǎn)量高：最高可實(shí)現(xiàn)3 mg/mL以上產(chǎn)率的蛋白制備。

5.蛋白共表達(dá)：可在同一反應(yīng)中進(jìn)行多目的蛋白的同時(shí)表達(dá)。

6.操作簡單：僅需將反應(yīng)組分與DNA模板混合即可制備蛋白。

7.支持高通量：可在96孔板中進(jìn)行，當(dāng)檢測到陽性表達(dá)后，可進(jìn)行體系放大。

8.適用種類多：可表達(dá)各種類型的蛋白，包括富含二硫鍵的蛋白、膜蛋白等。

1. 某蛋白A

圖1. 相同實(shí)驗(yàn)條件下,翌圣無細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)試劑盒和國內(nèi)以及國外競品N表達(dá)某蛋白A SDS-PAGE鑒定對比，結(jié)果顯示翌圣無細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)試劑盒優(yōu)于國內(nèi)以及進(jìn)口競品。

2.某蛋白B

圖2. 相同實(shí)驗(yàn)條件下,翌圣無細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)試劑盒和國內(nèi)競品表達(dá)某蛋白B SDS-PAGE鑒定對比，結(jié)果顯示翌圣無細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)試劑盒更優(yōu)。

干冰運(yùn)輸，-85~-65℃保存，有效期1年。

注：a.現(xiàn)用現(xiàn)配，如需溶解后分裝試劑，推薦分裝后用液氮冷激再置于-85~-65℃冰箱儲(chǔ)存?zhèn)溆茫苊夥磸?fù)凍融。

b.36851ES-D -25~-15℃保存。

Q₁：該系列產(chǎn)品是基于大腸桿菌系統(tǒng)開發(fā)，是否可替換真核系統(tǒng)的無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)產(chǎn)品？

A₁：如果已經(jīng)構(gòu)建好非E.coli體系的質(zhì)粒，需做密碼子優(yōu)化即可。

Q₂：無細(xì)胞體系表達(dá)出的蛋白，還需要純化嗎？

A₂：若針對抗體親和性及酶活性檢測，可不經(jīng)純化直接用于測試；若實(shí)驗(yàn)對蛋白純度有明確要求，或需開展細(xì)胞水平實(shí)驗(yàn)，則需參照常規(guī)蛋白表達(dá)產(chǎn)物的純化流程進(jìn)行后續(xù)處理。