來源
用途
交叉反應性
抗體類型
HDAC5分子量
Mouse
WB, IP, IC, E
H, M, R
IgG1
～124kD
??????WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IC, Immunocytochemistry; E, ELISA.
??????H, human; M, mouse; R, rat.
??????本HDAC5抗體(HDAC5?antibody，即Histone Deacetylase 5 antibody為進口分裝，用經過適當修飾的人工合成的HDAC5氨基端一段多肽(aa?4-19)作為抗原制備而成的抗HDAC5小鼠單克隆抗體?？寺√枮镠DAC5-35。
??????本HDAC5抗體識別的是總HDAC5(total?HDAC5)，可以檢測內源性的HDAC5，未發現和其它HDAC蛋白有交叉反應。
??????染色質由重復的核小體(necliosome)構成，而核小體則包含了由Histone?H2A，H2B，H3和H4各兩個分子組成的八聚體和與該八聚體結合的DNA。組蛋白(histone)上的一些Lys位點，可以被乙?；揎?，從而影響染色質的空間結構，最終影響該區域的基因轉錄調控。通常當組蛋白被乙?；瘯r，染色質處于相對松散的構象，此時轉錄因子可以結合到該區域促進相關基因的轉錄。反之，當組蛋白被去乙?；瘯r，染色質結構會變得相對致密，該區域相關基因的轉錄就會被抑制。組蛋白可以被多種乙?；敢阴；?，包括PCAF，p300/CBP，GCN5，SRC-1，TAFII250，BRCA-2和Patt1等。組蛋白去乙?；赴℉DAC(histone?deacetylase)家族和Sirtuin家族(Sirt家族)。HDAC家族包括HDAC1，HDAC2，HDAC3，HDAC4，HDAC5，HDAC6，HDAC7，HDAC8，HDAC9，HDAC10和HDAC11。通常HDAC可以去乙?；旧|中某些特定區域的組蛋白，導致該區域的染色質結構變得相對緊密，從而抑制該區域相關基因的表達。Class?I?HDAC包括HDAC1，2，3，8；Class II HDAC包括HDAC4，5，6，7，9，10。Sirtuin家族被稱為Class III HDAC。Class IV HDAC只包括HDAC11。HDAC1，2，8主要定位在細胞核；而HDAC3則在細胞核和細胞漿都有分布，并且分布在膜結構上。Class II HDAC在特定條件下可以在細胞核和細胞漿之間穿梭(shuttle in and?out)。HDAC在命名時被稱為組蛋白去乙酰化酶，但事實上它們可以去乙?；喾N多樣的蛋白。例如，HDAC6可以和微管(microtuble)結合，可以去乙?；痶ubulin，Hsp90和cortactin等。目前發現大量的蛋白可以被乙?；揎?，因此HDAC等乙?；揎椕副徽J為在基因轉錄調控、信號轉導、生長發育、分化凋亡、代謝性疾病和腫瘤等多種生理病理過程中發揮重要作用。HDAC的抑制劑目前被認為是很有前景的腫瘤治療藥物。
??????HDAC5具有組蛋白去乙?；富钚?，可以和HDAC3一起被免疫共沉淀。HDAC5在肌細胞分化過程中起重要作用。HDAC5可結合肌細胞增強因子(myocyte?enhancer?factor-2，MEF2)蛋白的氨基末端結構域，抑制MEF2下游基因的表達。在多種癌細胞中過表達HDAC5，會導致非P53依賴的生長抑制和細胞凋亡。
??????配套提供了Western一抗稀釋液，可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
??????建議抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據抗原水平的高低作適當調整)：
WB
IP
IC
E
1:1000
1:100
1:200
1:5000
??????本抗體如果用于常規的Western檢測，至少可以檢測20次。
包裝清單：
產品編號
產品名稱
包裝
AH392-1
HDAC5抗體(小鼠單抗)
20μl
AH392-2
Western一抗稀釋液
20ml
—
說明書
1份
保存條件：
??????HDAC5抗體-20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優先推薦4℃保存，長期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會導致出現輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項：
??????在Western實驗后，請注意回收稀釋的抗體?；厥盏目贵w在進行Western實驗時至少可以重復使用10次。稀釋后的抗體，包括已經使用過的稀釋抗體，4℃保存。
??????回收后重復使用的抗體，使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發現抗體出現輕微混濁現象，可以10000g離心1-3分鐘，取上清用于后續檢測。如果回收的抗體出現明顯的絮狀物或長霉長菌等情況，則可以考慮廢棄該抗體。
? ? ? 本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
??????為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
?
1. Western檢測：
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜或室溫緩慢搖動2小時，確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗，4℃保存以備下次繼續使用。
D. 按照Western的實驗步驟進行后續的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。
2. 免疫染色：
可以使用生產的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體，使用后注意回收稀釋好的一抗，
3. 其它實驗操作請自行參考適當的protocol進行。?