蛋白表達(dá)純化重組蛋白
產(chǎn)品名稱： 蛋白表達(dá)純化重組蛋白
英文名稱： protein
產(chǎn)品編號(hào)： protein
產(chǎn)品價(jià)格： 請(qǐng)咨詢
產(chǎn)品產(chǎn)地： 湖北
品牌商標(biāo)： null
更新時(shí)間： 2024-11-18T10:18:25
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 : 周經(jīng)理
- 地址 : 武漢市東湖新技術(shù)開發(fā)區(qū)關(guān)山大道465號(hào)中國光谷創(chuàng)意產(chǎn)業(yè)基地曙光廣場一期培訓(xùn)樓第三層311-A63號(hào)
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- 所在區(qū)域 : 湖北省
- 電話 : 177****4556 點(diǎn)擊查看
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- 郵箱 : yijiliao@126.com
蛋白表達(dá)與純化技術(shù)服務(wù)
步驟1. 目標(biāo)基因全基因合成：
- 從基因庫中搜索目標(biāo)蛋白的cDNA序列。
- 根據(jù)選用的表達(dá)系統(tǒng)對(duì)cDNA進(jìn)行密碼子優(yōu)化。
- 合成設(shè)計(jì)好的基因序列。
提供給客戶：目標(biāo)基因（在T載體或常規(guī)穿梭載體上）及測(cè)序報(bào)告。
時(shí)間：2~3周，根據(jù)基因的大小而定.
步驟2. 目標(biāo)基因亞克隆：
- 擴(kuò)增并抽提含有目標(biāo)基因的載體質(zhì)粒。
- 將目標(biāo)基因亞克隆到合適的表達(dá)質(zhì)粒上。
- 測(cè)序驗(yàn)證構(gòu)建質(zhì)粒的準(zhǔn)確性。
提供給客戶：正確構(gòu)建的重組表達(dá)質(zhì)粒，含重組質(zhì)粒的DH5α菌株及測(cè)序報(bào)告。
時(shí)間：1-2周
步驟3. E. coli表達(dá)菌株轉(zhuǎn)化及篩選：
- 擴(kuò)增并抽提構(gòu)建好的表達(dá)質(zhì)粒。
- 將表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到高效的E.Coli表達(dá)菌株中。
- 挑選陽性克隆于LB培養(yǎng)基中擴(kuò)增并誘導(dǎo)表達(dá)目標(biāo)蛋白。
- SDS-PAGE電泳檢測(cè)培養(yǎng)后中目標(biāo)蛋白的表達(dá)情況，并挑選合適的單克隆菌株用于目標(biāo)蛋白的表達(dá)。
- 可提供表達(dá)菌株：DH5α, Top10, JM115, BL21 (DE3), BL21 (DE3) pLys, XL1 Blue, XL10 Golden, Rosetta-gami等。
提供給客戶：重組質(zhì)粒的表達(dá)菌株及表達(dá)檢測(cè)報(bào)告。
步驟4. 目標(biāo)蛋白表達(dá)及純化：
- 搖瓶培養(yǎng)1L重組細(xì)菌，誘導(dǎo)表達(dá)目標(biāo)蛋白。
- 通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
- 利用蛋白酶去除不需要的純化標(biāo)簽，再純化獲得所需的目標(biāo)蛋白（可選，構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)需加入合適的蛋白酶切位點(diǎn)）。
- 通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
- 通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
提供給客戶：純化好的目標(biāo)蛋白1~5mg及純化報(bào)告。如需增量可咨詢銷售人員。
本公司可為客戶提供全面的生物學(xué)服務(wù)平臺(tái)，主要有：
1）基因合成服務(wù)：引物設(shè)計(jì)合成，密碼子優(yōu)化，DNA測(cè)序 , TA克隆
2) RNAi 服務(wù)，RNAi 載體構(gòu)建、RNAi 導(dǎo)入優(yōu)化和干擾評(píng)價(jià)
3) 蛋白表達(dá)與純化服務(wù)，包括哺乳動(dòng)物、細(xì)菌、酵母和病毒表達(dá)
4) 多克隆抗體制備和純化：公司擁有cDNA文庫
5) 基因表達(dá)分析服務(wù)，實(shí)時(shí)定量PCR ，Western Blot，探針設(shè)計(jì)合成
6) 克隆服務(wù)，包括TA克隆、PCR 克隆和亞克隆、基因突變、載體設(shè)計(jì)和病毒構(gòu)建包裝等專業(yè)服務(wù)
7）多肽合成：
8）細(xì)胞轉(zhuǎn)染：包括細(xì)胞培養(yǎng)，MTT檢測(cè)，瞬時(shí)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染